【摘 要】
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目的:研究达格列净（dapagliflozin,Dapa）对急性心肌梗死大鼠心功能和心肌纤维化的影响。方法:选择健康雄性Wistar大鼠,称重后诱导麻醉使用3%异氟烷并用2%异氟烷维持麻醉,区别于传统方法,在不需要辅助呼吸情况下,胸部开小口,借助蚊式钳撑开肋间将心脏挤出体外,快速结扎左前降支（LAD）后将心脏纳回至胸腔,关闭切口。Sham组（A组）仅将缝线穿过前降支而不结扎。按照随机数字表法将心肌
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目的:研究达格列净（dapagliflozin,Dapa）对急性心肌梗死大鼠心功能和心肌纤维化的影响。方法:选择健康雄性Wistar大鼠,称重后诱导麻醉使用3%异氟烷并用2%异氟烷维持麻醉,区别于传统方法,在不需要辅助呼吸情况下,胸部开小口,借助蚊式钳撑开肋间将心脏挤出体外,快速结扎左前降支（LAD）后将心脏纳回至胸腔,关闭切口。Sham组（A组）仅将缝线穿过前降支而不结扎。按照随机数字表法将心肌梗死大鼠随机分为四个亚组,一组给予等体积生理盐水4周,设为AMI组（B组）;一组接受Dapa（C组,10mg/kg/d）经食道给药4周;一组接受卡托普利（D组,6.75mg/kg/d）经食道给药4周;一组接受Dapa（10mg/kg/d）联合卡托普利（6.75mg/kg/d）（E组）给药4周。第28天时存活的大鼠共39只,其中A组8只、B组7只、C组9只、D组9只、E组6只。称取左心室重量并取左心室非梗死心肌组织于-80℃保存备用。采用WST-1法测定取材前血清中SOD的活性;采用ELISA法测定取材前血清中IL-6、TNF的浓度,RT-q PCR法检测IL-6、collagen-1、collagen-3、和TNF-a的浓度;采用Western Blot测定STAT3、p-STAT3、a-SMA的表达;用免疫组化测定STAT3、pSTAT3、a-SMA的表达。结果:术后四周,B组和A组相比,心功能、心脏结构以及心肌纤维化的面积有显著差异（P＜0.05）,C组与B组相比,EF值和均有显著上升,差异具有统计学意义,LVEDD、LVESD、LVEDV、LVESV均有显著的下降,差异同样具有统计学意义（p＜0.05）。D组与B组相比,EF%和FS%同样有上升趋势,但上升的程度与C组相比,上升程度较小;LVEDD、LVESD、LVEDV、LVESV同样具有下降趋势,但是与C组比,下降的程度也较小。E组中的EF%和FS%等指标相比B组同样具有显著的改善效果,但单独与C组相比,除LVEDV外,其余指标的结果显示其联合用药的改善程度均小于单独使用Dapa,但两组间差异不显著。HE染色、天狼星红染色及Masson染色等形态学检测结果显示:Dapa可以显著的降低AMI后心肌组织炎症细胞的浸润、胶原纤维的含量以及心肌纤维化的程度,差异同样具有统计学意义（P＜0.05）,D组相比B组同样具有改善作用,但改善程度均低于C组,且结果表明Dapa和ACEI在减少炎症细胞浸润及改善心肌纤维化程度方面具有协同作用。与A组相比,B组的IL-6、TNF-a血清浓度有明显上升、SOD血清浓度有显著的下降,差异具有显著的统计学差异（P＜0.05）;而C组中IL-6、TNF-a血清浓度显著下降,且SOD的血清浓度有显著提升;D组中的IL-6和TNF-a同样下降,SOD的浓度同样上升,但改善程度低于C组;E组在降低血清中IL-6和TNF-a浓度以及增加血清SOD浓度中同样有较显著的作用;RT-q PCR结果显示B组中的IL-6、TNF-a、Collagen-1和Collagen-3相比正常组有明显的增高,C组中的IL-6、TNF-a、Collagen-1和Collagen-3显著降低,差异同样具有统计学意义,ACEI同样可以减少其表达的程度,但低于Dapa,E组效果优于单药组。结论:Dapa可以显著的改善急性心肌梗死大鼠的心功能,有效减轻左心室扩大,减少梗死后心肌炎症的反应、炎症细胞的浸润、心肌细胞的坏死、水肿及减轻氧化应激反应,同时可以有效的抑制心肌纤维化的发生,降低a-SMA的表达;同时还可以下调STAT3的表达,上调p-STAT3的磷酸化水平。以上研究结果均表明Dapa可以显著的改善大鼠急性心肌梗死后心室重构,此作用可能和降低下调STAT3的表达,降低p-STAT3的磷酸化水平以及抑制氧化应激反应等有关。
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