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目的：
一、基于胃脑相关理论，复制N-甲基-N’硝基-N-亚硝基胍(MNNG)+饥饱失常+慢性不可预测轻度应激(Chronic unpredictable mild stress，CUMS)大鼠模型，探讨情志干预对胃癌前病变(GPL)大鼠摄食功能的变化及胃黏膜的影响，筛选“炎-癌”演变期中与癌变及摄食相关的关键指标;
二、观察慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠癌变及摄食相关的关键指标变化，并采用电针足三里治疗，探讨电针是否通过介导胃及下丘脑摄食相关因子及受体，调节CAG大鼠摄食功能，改善其胃黏膜病变及炎症等相关指标，对胃黏膜产生保护作用。
方法：
一、情志干预型胃癌前病变大鼠模型的建立及其摄食变化的研究（实验一）选用60只SD雄性大鼠，随机分为空白组、胃癌前病变模型组(GPL)、情志干预型胃癌前病变模型组(GPL+CUMS)，每组12只。采用连续28周200μg/ml的MNNG饮用液自由饮用，配合饥饱失常（隔日禁食法）建立GPL大鼠模型。GPL+CUMS组在GPL大鼠模型的基础上，连续28周结合CUMS建立GPL+CUMS大鼠模型，动态观察各组大鼠的一般情况及食物摄入量。观察28周后各组行为学和糖水偏好。大鼠处死后，采用ELISA法测血清白介素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、饥饿素(Ghrelin，GHRL)、瘦素(Leptin，LEP)、生长抑素(Somatostatin，SS);取胃黏膜，肉眼下观察胃黏膜组织大体病变，并行苏木精和伊红(HE、爱先蓝-糖原(AB-PAS)、高铁二胺-爱先蓝(HID-AB)染色，在光镜下观察其病理变化：免疫荧光法观察大鼠胃组织中Ghrelin、胃动蛋白（Gastrokine-2，GKN2）的表达情况。
二、电针足三里对慢性萎缩性胃炎大鼠摄食功能调节机制研究（实验二）选用60只SD雄性大鼠随机分为空白组及慢性萎缩性胃炎模型组(CAG)。采用连续16周200μg/ml的MNNG饮用液自由饮用+饥饱失常（隔日禁食法）复制CAG大鼠模型。CAG模型组大鼠随机均分为CAG模型组(CAG)、电针足三里组（疏密波电针后三里：疏波频率2Hz、密波频率10Hz、强度0.3-0.5mA、10min/次，6次/周）和电针非穴组（疏密波电针非经非穴），每组12只。于第17周开始连续治疗8周，均正常饲养，动态观察各组大鼠的一般情况，体重及食物摄入量：大鼠处死后，采用ELISA法测定血清中lL-6、IL-10、TNF-α、Ghrolin、SS、Leptin、前列腺素E2(Prostaglandin，PGE2)的含量;取胃黏膜，采用HE、AB-PAS和HIDAB染色，光镜下观察胃黏膜病理变化;免疫荧光法观察胃组织中Ghrelin、Leptin、神经肽Y(Neuropeptide Y，NPY)与GKN2表达情况，WB法测胃组织中GKN2、生长激素促分泌素受体(Crowth Hormone Secretagogue Receptor，GHSR)、瘦素受体(Leptin receptor，LEPR)蛋白表达;取下丘脑，免疫荧光双标法观察NPY与刺鼠肽基因相关蛋白(Agouti-Related protein，AgRP)表达情况，WB法测GHSR、LEPR、阿黑皮素原(Pro-opiomelanocortin，POMC)蛋白表达。
结果：
一、情志干预型胃癌前病变大鼠模型的复制及其摄食行为研究（实验一）
与空白组相比，GPL与GPL+CUMS大鼠一般状况较差，体重下降，造模期间摄食量波动较大。旷场实验结果显示，与空白组相比，GPL大鼠和GPL+CUMS大鼠在总路程和平均速度均显著降低（P＜0.05）。与空白组和GPL组相比，GPL+CUMS组中央区域路程与总路程之比显著增加（P＜0.05），在中央区域的时间占总时间的比例显著增加（P＜0.05）。与空白组比较，GPL+CUMS组糖水偏好百分比显著降低（P＜0.05），GPL组糖水偏好百分比未见明显改变（P＞0.05）。
在肉眼及光镜下观察，结果显示，GPL+CUMS可引起肿瘤发生，并加速GPL进展。与空白组相比，GPL与GPL+CUMS血清中炎症相关因子（IL-6、TNF-α）含量增加（P＜0.05），脑肠肽中Ghrelin、Leptin含量减少（P＜0.05），SS含量增加（P＜0.05）。与GPL相比，GPL+CUMS组血清中TNF-α与SS有显著增高（P＜0.05）。与空白组相比，GPL与GPL+CUMS胃组织及肿瘤附近胃黏膜中GKN2及Ghrelin的表达异常增多，而肿瘤中GKN2及Ghrelin表达减少。
二、电针足三里治疗慢性萎缩性胃炎研究（实验二）
CAG大鼠一般状况较差，体重下降，造模及恢复期间摄食量波动较大。CAG大鼠血清中炎症相关因子（IL-6、TNF-α）含量升高（P＜0.05），IL-10和PGE2含量降低（P＜0.05），脑肠肽中Ghrelin、Leptin含量降低（P＜0.05），SS含量升高(P＜0.05);CAG大鼠胃组织中Ghrelin与Leptin阳性表达增加，其中Ghrelin出现明显局灶性阳性表达增多，NPY阳性表达减少，GKN2、LEPR表达增加（P＜0.05），GHSR表达减少(P＜0.05)：CAG大鼠下丘脑中NPY、AgRP表达异常增多，LEPR、GHSR、POMC表达增加（P＜0.05）。
电针足三里可改善CAG大鼠一般状况，增加CAG大鼠体重及稳定摄食量，改善胃黏膜病变。与CAG组相比，电针足三里组和电针非穴组可降低血清中炎症相关因子（IL-6、TNF-α）含量（P＜0.05）。电针足三里组可血清中增加IL-10和PGE2含量(P＜0.05)，脑肠肽中Ghrelin、Leptin含量增加（P＜0.05），SS含量减少(P＜0.05），而电针非穴组对CAG大鼠血清中IL-10、PGE2、Ghrelin、Leptin、SS含量未见明显改善（P＞0.05）。
电针足三里组和电针非穴组胃组织中Ghrelin未见明显局灶性阳性表达，两组均可增加NPY表达。电针足三里组可减少CAG大鼠胃组织中Leptin表达，减少GKN2、LEPR表达（P＜0.05），增加GHSR表达（P＜0.05）。电针足三里可减少CAG大鼠下丘脑中NPY、AgRP表达，减少LEPR、GHSR、POMC表达（P＜0.05）。电针非穴组对CAG大鼠胃组织中GKN2、LEPR、GHSR表达未见明显改善（P＞0.05），对下丘脑中NPY、AgRP表达未见明显改善，下丘脑中LEPR、GHSR、POMC未见明显改善（P＞0.05）。
结论：
一、摄食紊乱影响CAG“炎-癌”演变期的发生发展;
二、在“炎-癌”演变期中情志改变属于危险因素之一：
三、CAG大鼠摄食紊乱可能与NPY信号传导异常，或食物摄入与能量消耗失衡相关：
四、“炎-癌”演变期阶段，胃黏膜上皮细胞重度异型增生或癌变可能通过周围血管或新生微血管发生血道转移，且GPL期癌细胞浸润基底膜之前即可能发生癌细胞的血道转移;
五、Ghrelin与GKN2可能与早期血道转移有关，是“炎-癌”演变期发展及预后的的有效观察指标;
六、足三里具有穴位特异性，电针足三里可通过介导摄食相关因子Ghrelin与Leptin及其受体表达，调控下丘脑NPY/AgRP与POMC神经元，稳定摄食，改善CAG大鼠胃黏膜炎症。
一、基于胃脑相关理论，复制N-甲基-N’硝基-N-亚硝基胍(MNNG)+饥饱失常+慢性不可预测轻度应激(Chronic unpredictable mild stress，CUMS)大鼠模型，探讨情志干预对胃癌前病变(GPL)大鼠摄食功能的变化及胃黏膜的影响，筛选“炎-癌”演变期中与癌变及摄食相关的关键指标;
二、观察慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠癌变及摄食相关的关键指标变化，并采用电针足三里治疗，探讨电针是否通过介导胃及下丘脑摄食相关因子及受体，调节CAG大鼠摄食功能，改善其胃黏膜病变及炎症等相关指标，对胃黏膜产生保护作用。
方法：
一、情志干预型胃癌前病变大鼠模型的建立及其摄食变化的研究（实验一）选用60只SD雄性大鼠，随机分为空白组、胃癌前病变模型组(GPL)、情志干预型胃癌前病变模型组(GPL+CUMS)，每组12只。采用连续28周200μg/ml的MNNG饮用液自由饮用，配合饥饱失常（隔日禁食法）建立GPL大鼠模型。GPL+CUMS组在GPL大鼠模型的基础上，连续28周结合CUMS建立GPL+CUMS大鼠模型，动态观察各组大鼠的一般情况及食物摄入量。观察28周后各组行为学和糖水偏好。大鼠处死后，采用ELISA法测血清白介素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、饥饿素(Ghrelin，GHRL)、瘦素(Leptin，LEP)、生长抑素(Somatostatin，SS);取胃黏膜，肉眼下观察胃黏膜组织大体病变，并行苏木精和伊红(HE、爱先蓝-糖原(AB-PAS)、高铁二胺-爱先蓝(HID-AB)染色，在光镜下观察其病理变化：免疫荧光法观察大鼠胃组织中Ghrelin、胃动蛋白（Gastrokine-2，GKN2）的表达情况。
二、电针足三里对慢性萎缩性胃炎大鼠摄食功能调节机制研究（实验二）选用60只SD雄性大鼠随机分为空白组及慢性萎缩性胃炎模型组(CAG)。采用连续16周200μg/ml的MNNG饮用液自由饮用+饥饱失常（隔日禁食法）复制CAG大鼠模型。CAG模型组大鼠随机均分为CAG模型组(CAG)、电针足三里组（疏密波电针后三里：疏波频率2Hz、密波频率10Hz、强度0.3-0.5mA、10min/次，6次/周）和电针非穴组（疏密波电针非经非穴），每组12只。于第17周开始连续治疗8周，均正常饲养，动态观察各组大鼠的一般情况，体重及食物摄入量：大鼠处死后，采用ELISA法测定血清中lL-6、IL-10、TNF-α、Ghrolin、SS、Leptin、前列腺素E2(Prostaglandin，PGE2)的含量;取胃黏膜，采用HE、AB-PAS和HIDAB染色，光镜下观察胃黏膜病理变化;免疫荧光法观察胃组织中Ghrelin、Leptin、神经肽Y(Neuropeptide Y，NPY)与GKN2表达情况，WB法测胃组织中GKN2、生长激素促分泌素受体(Crowth Hormone Secretagogue Receptor，GHSR)、瘦素受体(Leptin receptor，LEPR)蛋白表达;取下丘脑，免疫荧光双标法观察NPY与刺鼠肽基因相关蛋白(Agouti-Related protein，AgRP)表达情况，WB法测GHSR、LEPR、阿黑皮素原(Pro-opiomelanocortin，POMC)蛋白表达。
结果：
一、情志干预型胃癌前病变大鼠模型的复制及其摄食行为研究（实验一）
与空白组相比，GPL与GPL+CUMS大鼠一般状况较差，体重下降，造模期间摄食量波动较大。旷场实验结果显示，与空白组相比，GPL大鼠和GPL+CUMS大鼠在总路程和平均速度均显著降低（P＜0.05）。与空白组和GPL组相比，GPL+CUMS组中央区域路程与总路程之比显著增加（P＜0.05），在中央区域的时间占总时间的比例显著增加（P＜0.05）。与空白组比较，GPL+CUMS组糖水偏好百分比显著降低（P＜0.05），GPL组糖水偏好百分比未见明显改变（P＞0.05）。
在肉眼及光镜下观察，结果显示，GPL+CUMS可引起肿瘤发生，并加速GPL进展。与空白组相比，GPL与GPL+CUMS血清中炎症相关因子（IL-6、TNF-α）含量增加（P＜0.05），脑肠肽中Ghrelin、Leptin含量减少（P＜0.05），SS含量增加（P＜0.05）。与GPL相比，GPL+CUMS组血清中TNF-α与SS有显著增高（P＜0.05）。与空白组相比，GPL与GPL+CUMS胃组织及肿瘤附近胃黏膜中GKN2及Ghrelin的表达异常增多，而肿瘤中GKN2及Ghrelin表达减少。
二、电针足三里治疗慢性萎缩性胃炎研究（实验二）
CAG大鼠一般状况较差，体重下降，造模及恢复期间摄食量波动较大。CAG大鼠血清中炎症相关因子（IL-6、TNF-α）含量升高（P＜0.05），IL-10和PGE2含量降低（P＜0.05），脑肠肽中Ghrelin、Leptin含量降低（P＜0.05），SS含量升高(P＜0.05);CAG大鼠胃组织中Ghrelin与Leptin阳性表达增加，其中Ghrelin出现明显局灶性阳性表达增多，NPY阳性表达减少，GKN2、LEPR表达增加（P＜0.05），GHSR表达减少(P＜0.05)：CAG大鼠下丘脑中NPY、AgRP表达异常增多，LEPR、GHSR、POMC表达增加（P＜0.05）。
电针足三里可改善CAG大鼠一般状况，增加CAG大鼠体重及稳定摄食量，改善胃黏膜病变。与CAG组相比，电针足三里组和电针非穴组可降低血清中炎症相关因子（IL-6、TNF-α）含量（P＜0.05）。电针足三里组可血清中增加IL-10和PGE2含量(P＜0.05)，脑肠肽中Ghrelin、Leptin含量增加（P＜0.05），SS含量减少(P＜0.05），而电针非穴组对CAG大鼠血清中IL-10、PGE2、Ghrelin、Leptin、SS含量未见明显改善（P＞0.05）。
电针足三里组和电针非穴组胃组织中Ghrelin未见明显局灶性阳性表达，两组均可增加NPY表达。电针足三里组可减少CAG大鼠胃组织中Leptin表达，减少GKN2、LEPR表达（P＜0.05），增加GHSR表达（P＜0.05）。电针足三里可减少CAG大鼠下丘脑中NPY、AgRP表达，减少LEPR、GHSR、POMC表达（P＜0.05）。电针非穴组对CAG大鼠胃组织中GKN2、LEPR、GHSR表达未见明显改善（P＞0.05），对下丘脑中NPY、AgRP表达未见明显改善，下丘脑中LEPR、GHSR、POMC未见明显改善（P＞0.05）。
结论：
一、摄食紊乱影响CAG“炎-癌”演变期的发生发展;
二、在“炎-癌”演变期中情志改变属于危险因素之一：
三、CAG大鼠摄食紊乱可能与NPY信号传导异常，或食物摄入与能量消耗失衡相关：
四、“炎-癌”演变期阶段，胃黏膜上皮细胞重度异型增生或癌变可能通过周围血管或新生微血管发生血道转移，且GPL期癌细胞浸润基底膜之前即可能发生癌细胞的血道转移;
五、Ghrelin与GKN2可能与早期血道转移有关，是“炎-癌”演变期发展及预后的的有效观察指标;
六、足三里具有穴位特异性，电针足三里可通过介导摄食相关因子Ghrelin与Leptin及其受体表达，调控下丘脑NPY/AgRP与POMC神经元，稳定摄食，改善CAG大鼠胃黏膜炎症。