目的:舒尼替尼作为最早应用的口服靶向药之一,在肾细胞癌的治疗中显示出了良好的疗效,显著延长了晚期肿瘤患者的生存期。舒尼替尼作为受体酪氨酸激酶抑制剂,主要通过阻断血管生成、抑制肿瘤细胞增殖及诱导肿瘤细胞死亡来发挥抗肿瘤作用。但随着治疗的进行,肿瘤也会进化出对舒尼替尼的药物抗性,从而限制了药物的治疗效果。尽管以往的研究已经对舒尼替尼药物抗性的机制进行了深入研究,但多聚焦于肿瘤细胞内源性的抗性机制。对于肿瘤微环境中的外源性分子,尤其是免疫系统相关信号对于药物反应性的调控却知之甚少。γ干扰素（Interferon-γ,IFNγ）作为效应性T细胞发挥抗肿瘤作用时的重要免疫调节因子,其存在于肿瘤微环境中并受到免疫治疗的激活。本研究重点探究IFNγ对舒尼替尼药物反应性的影响,并探究二者联合诱导肿瘤细胞死亡的分子机制。探索在体内复杂的肿瘤微环境中,IFNγ信号通路对肿瘤细胞的增殖以及对靶向药物的敏感性的影响,为预测舒尼替尼的疗效及其与免疫治疗的联合疗法提供理论基础。方法:采用流式细胞术检测IFNγ与舒尼替尼在多种肿瘤细胞中诱导细胞死亡的比例。采用活细胞工作站实时成像,于细胞生长适宜环境监测肿瘤细胞生长状态。采用CCK8细胞增殖/毒性检测验证体外γ干扰素与舒尼替尼协同诱导肿瘤增殖活力改变。采用凋亡、坏死、自噬、铁死亡等多种不同类型细胞死亡抑制剂探索IFNγ与舒尼替尼在多种肿瘤细胞中诱导细胞死亡的类型。采用Western Blot技术检测肿瘤细胞凋亡关键响应蛋白Caspase3,PARP的表达以验证γ干扰素与舒尼替尼协同诱导肿瘤细胞凋亡。采用Crispr/Cas9基因编辑技术,设计靶向目的基因的sg RNA并将其导入p Lenti Crispr V2载体。进行质粒慢病毒包装、侵染及嘌呤霉素抗性筛选获取稳定转染肿瘤细胞株。再使用单克隆筛选技术扩增单克隆细胞,验证单克隆细胞后将阳性单克隆等比例混合,成功构建γ干扰素受体（Interferon-γReceptor,IFNγR）敲除小鼠肾癌细胞。采用Balb/c小鼠皮下瘤模型研究舒尼替尼治疗效果及小鼠适宜剂量。采用Balb/c小鼠肾原位肿瘤模型体内验证IFNγ调控舒尼替尼敏感性。结果:在多种人和小鼠的肾癌及其他类型肿瘤细胞系中,IFNγ能够增强舒尼替尼的抗肿瘤活性。IFNγ与舒尼替尼协同作用诱导肿瘤细胞死亡,且该细胞死亡能够被泛Caspase抑制剂IDN-6556所抑制,但不能被程序性坏死抑制剂Necrostatin-1、铁死亡抑制剂Ferrostatin-1及自噬抑制剂氯喹所抑制。IFNγ与舒尼替尼协同作用诱导肿瘤细胞中Caspase3的活化及PARP的切割,表明二者协同诱导肿瘤细胞的凋亡。小鼠肾癌皮下瘤模型中,舒尼替尼能够显著抑制肿瘤的生长。该研究成功构建了小鼠肾癌原位肿瘤模型,在该肿瘤模型中,与野生型肿瘤相比,IFNγR在肿瘤细胞中的缺失能够显著抑制舒尼替尼的抗肿瘤效果。结论:γ干扰素增强肿瘤细胞对舒尼替尼的敏感性,二者协同诱导肿瘤细胞凋亡。舒尼替尼在免疫健全小鼠体内具有较好的抑制肿瘤生长的效果。体内γ干扰素通路的阻断降低了舒尼替尼的疗效,提示γ干扰素通路的活化可以促进肿瘤细胞对靶向药物的敏感性,为在肾癌治疗中靶向治疗与免疫治疗的联合应用提供了分子基础。