【摘 要】
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本文对卵巢注射转基因方法的建立及应用进行了研究。文章首先以gfp基因为报告基因，选择体成熟的ICR雌性小鼠，通过外科手术暴露其卵巢，用显微注射针将适量外源质粒注入小鼠的两侧
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本文对卵巢注射转基因方法的建立及应用进行了研究。文章首先以gfp基因为报告基因，选择体成熟的ICR雌性小鼠，通过外科手术暴露其卵巢，用显微注射针将适量外源质粒注入小鼠的两侧卵巢，缝合肌肉和皮肤，待其恢复后与正常雄鼠合笼，待其产仔后，利用PCR方法检测F1代基因组的阳性率。然后对F1代小鼠的基因组进行Southem斑点杂交，取15日龄的小鼠胚胎细胞进行原代培养，并在荧光显微镜下观察。将获得PCR阳性后代通过阳性鼠之间的杂交证实，外源基因最多可传递至F6代，阳性小鼠的性别比例不受转基因的影响。通过对外源基因的状态、有无脂质体包裹、小鼠品系等优化试验证实，该方法适用的一些最佳条件为环状质粒，不用脂质体包裹，直接注射入性成熟小鼠的卵巢。
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