鸡内金炮制前后药效作用及多糖组分含量比较研究

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目的:生鸡内金由于具有腥臭味及质地硬脆,常需炮制后使用。该文旨在比较生、炒鸡内金抗胃溃疡和消食作用及多糖含量的差异,探究鸡内金的炮制机理。方法:(1)采用正交设计试验,以炮制过程中的物料比(1:20、1:30、1:40)、砂炒温度(210±5、230±5、250±5℃)及砂炒时间(40、60、80 s)为考察因素,以炒品的外观性状,对食积小鼠的胃排空和肠推进作用和HPLC总峰面积为评价指标,进行炒鸡内金炮制工艺的优选,并通过谱效分析,筛选鸡内金消食作用的物质基础。(2)采用幽门结扎和无水乙醇诱导的方法,建立两种大鼠胃溃疡模型,比较生、炒鸡内金对两种模型大鼠胃溃疡的溃疡面积、胃液分泌(胃液体积、p H值、游离酸度、总酸度和胃蛋白酶活性)、胃壁粘液的分泌和血清中生化指标(PGE2、TNF-α、IL-1β、IL-6、SOD、GSH和MDA)含量的影响。(3)建立食积小鼠模型,比较生、炒鸡内金对小鼠的胃残留率和肠推进率、血清中胃肠道激素(GAS、MTL、VIP、CCK)含量;以肾上腺素、异丙肾上腺素、阿托品、乙酰胆碱和Ba Cl2为工具药,模拟大鼠离体十二指肠肠肌的不同生理状态,考察生、炒鸡内金对大鼠离体十二指肠收缩张力的影响。(4)用苯酚-硫酸法和衍生化-HPLC分别测定生、炒鸡内金中总多糖及其单糖组成的含量。结果:(1)影响鸡内金质量的三个因素依次为砂炒时间>物料比>砂炒温度,各个因素各个水平间无显著性差异(P>0.05)。综合选择后所选工艺参数为:取鸡内金30倍量的河砂,于砂温为245~255℃时,加入生鸡内金翻炒80 s。鸡内金的HPLC特征峰中,4和5号峰为影响鸡内金消食作用的物质基础。(2)生、炒鸡内金均可以显著降低两种胃溃疡模型大鼠的胃溃疡面积,改善胃溃疡组织的坏死、充血、水肿和炎性细胞浸润等病变症状,显示明显的抗胃溃疡作用;低、中剂量的生、炒鸡内金对幽门结扎诱导的胃溃疡模型的作用效果明显(P<0.05),中、高剂量的生、炒鸡内金对乙醇诱导的胃溃疡作用效果明显(P<0.05);低剂量的鸡内金可以显著降低胃液胃蛋白酶活性(P<0.05);中剂量的鸡内金可以促进胃壁粘液的分泌(P<0.05),并可通过增加PGE2在血清中的含量促进粘液的分泌;鸡内金可以显著降低幽门结扎诱导的胃溃疡模型大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6的含量(P<0.05),升高SOD和GSH的水平(P<0.05);显著降低乙醇诱导的胃溃疡模型大鼠血清中IL-1β、IL-6和MDA的含量(P<0.05),显著升高血清中SOD和GSH的水平(P<0.05)。综合两种大鼠胃溃疡模型的研究结果,鸡内金的中剂量均可起到抗胃溃疡作用,且炒品的效果较生品在降低胃溃疡面积和改善病理症状方面的效果好。鸡内金抗胃溃疡的作用是通过增加胃粘液的分泌,在胃壁形成一层保护膜,抗御外来因素的破坏;调节炎症因子和氧化因子的表达,从而达到抗胃溃疡的作用。(3)灌胃给药不同剂量的鸡内金后,可以明显降低食积小鼠的胃残留率,升高食积小鼠的肠推进率(P<0.05);相同剂量的生、炒品组比较,生品对小鼠的胃排空作用较强,炒品对小鼠的肠推进作用较强(P>0.05);鸡内金可以显著降低血清中GAS的含量(P<0.05),低剂量生品和中剂量炒品可以显著升高血清中CCK的含量(P<0.05),生品可以升高小鼠血清中MTL的含量(P>0.05),生、炒品对VIP的影响不明显(P>0.05);鸡内金可以抑制大鼠离体十二指肠平滑肌的收缩,且生品抑制效率较炒品高;鸡内金可以通过M受体和α受体调节肠平滑肌的张力,使之趋于正常。综合体内和体外实验的研究结果,鸡内金对食积小鼠的消食作用机理为鸡内金可促进胃酸的分泌,调节胃肠激素GAS和CCK的水平,通过M受体和α受体调节肠平滑肌的张力,且对肠道具有双向作用。(4)鸡内金炒制后总多糖的含量升高,炒制可以促进鸡内金多糖的溶出。鸡内金多糖由甘露糖、盐酸氨基葡萄糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、氨基半乳糖盐酸盐、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖和岩藻糖11种单糖组成;炒鸡内金的各个单糖的含量较生鸡内金升高。结论:生、炒鸡内金间的抗胃溃疡和消食作用无明显差异,鸡内金生品在抗幽门结扎诱导的大鼠胃溃疡方面和对食积小鼠的胃排空方面的作用效果较好,鸡内金炒品在抗乙醇诱导的胃溃疡方面和对食积小鼠的肠推进方面的作用效果较好。鸡内金砂炒后促进了多糖的溶出,使单糖的含量升高,该研究为鸡内金炮制机理的研究奠定了基础。
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