【摘 要】
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目的:证实红景天苷治疗胆汁淤积性肝纤维化的疗效,并且在动物实验和细胞层面探讨红景天苷的作用机制。方法:采用来自朱慧博士实验的正常组、BDL（Bile Duct Ligation,BDL）模型组、红景天苷组大鼠的肝组织。用蛋白免疫印迹法检测α-SMA（α-Smooth Muscle Actin,α-SMA）、CK7（Cytokeratin 7,CK7）,q PCR法检测Col.Ⅰ（Collagen
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81373859）；
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目的:证实红景天苷治疗胆汁淤积性肝纤维化的疗效,并且在动物实验和细胞层面探讨红景天苷的作用机制。方法:采用来自朱慧博士实验的正常组、BDL（Bile Duct Ligation,BDL）模型组、红景天苷组大鼠的肝组织。用蛋白免疫印迹法检测α-SMA（α-Smooth Muscle Actin,α-SMA）、CK7（Cytokeratin 7,CK7）,q PCR法检测Col.Ⅰ（Collagen type I,Col.Ⅰ）,分析纤维化程度及胆管增生程度;q PCR法检测lnc RNAH19（H19）表达情况;采用WST-1法测定检测肝组织SOD、采用TBA法测定MDA含量及q PCR法检测HO-1 m RNA、NQO1 m RNA、GSH-Px m RNA的表达量,分析肝脏的过氧化情况。培养LX-2细胞系,分为正常对照组、正常对照+空质粒组、H19过表达组、红景天苷+H19过表达组、红景天苷+空质粒组、正常对照+红景天苷组。提取总RNA,用q PCR检测H19及α-SMA m RNA、Col.Ⅰm RNA表达情况。结果:BDL模型组大鼠肝组织α-SMA、CK7蛋白和Col.Ⅰm RNA的表达（相对表达量分别为3.60、3.42和15.27）较正常组（相对表达量均为1）均显著升高（均P＜0.001）;SOD活性（2250.48±522.97U/mg）较正常组（3046.29±174.3U/mg）显著降低（P＜0.01）,MDA含量（1.62±0.72nmol/mg）较正常组（0.88±0.08nmol/mg）显著升高（P＜0.01）;与正常组相比,BDL模型大鼠肝组织GSH-Px m RNA和NQO1 m RNA表达水平（相对表达量分别为0.34和0.36）显著降低（均P＜0.01）,HO-1m RNA表达水平（相对表达量为2.11）显著升高（P＜0.01）。模型组大鼠肝组织H19相对表达量显著升高,是正常组的7.56倍（P＜0.001）。红景天苷组大鼠肝组织α-SMA蛋白（2.34 vs.模型组3.60）、Col.Ⅰm RNA（9.72 vs.模型组15.27）表达量与模型组相比差异具有统计学意义（P＜0.01）,提示红景天苷组大鼠肝组织HSC活化程度较模型组明显减轻,同时红景天苷组大鼠肝组织CK7（2.02 vs.模型组3.42）蛋白表达量较模型组差异有统计学意义（P＜0.01）,提示红景天苷组大鼠肝组织胆管增生的情况亦明显好转。红景天苷组大鼠肝组织的H19表达只是正常组的1.6倍,与模型组相比差异具有统计学意义（P＜0.001）。红景天苷组大鼠肝脏脂质过氧化损伤情况得到了明显的抑制,该组肝组织SOD活性（2893.24±425.94U/mg vs.模型组2250.48±522.97U/mg）、MDA含量（1.09±0.2nmol/mg vs.模型组1.62±0.72nmol/mg）与模型组相比差异有统计学意义（均P＜0.01）。同时HO-1m RNA相对表达量（1.05 vs.模型组2.11）、NQO1m RNA和GSH-Px m RNA相对表达量（分别为1.43和0.82 vs.模型组0.34和0.36）和模型组之间的差异均具有统计学意义（均P＜0.01）。体外实验结果显示:LX-2转染H19质粒后,H19表达显著上升,H19过表达组的H19相对正常对照组的相对表达量为100830.82倍（P＜0.001）,而红景天苷能抑制H19的过表达,红景天苷+H19过表达组的相对表达量为46930.47倍,其升高程度弱于H19过表达组,差异有统计学意义（P＜0.001）。然而H19的过表达没有明显影响LX-2对α-SMA和Col.I m RNA的表达。结论:红景天苷对BDL纤维化模型大鼠的肝脏纤维化有抑制作用,其作用机制之一可能与通过下调H19的表达、抗过氧化损伤有关。
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