前言:滋养层发育和滋养层-子宫之间的相互作用是构成人胎盘发育的重要组成部分,涉及多种复杂的分子机制,且其相关功能和特性尚未完全阐明。这些分子的表达异常及调控机制受损通常会导致妊娠并发症,如早期流产（妊娠前三个月自发性流产）。由于早期复发性流产（recurrent spontaneous abortion,RSA）的高患病率和RSA的病理和病理生理机制尚未完全阐明。因此,目前还没有针对这种妊娠并发症的有效治疗措施。碘甲状腺原氨酸去碘酶2（iodothyronine deiodinase 2,Di O2）是一种含硒酶,它通过将四碘甲状腺原氨酸（T4）转化为三碘甲状腺原氨酸（T3）来激发细胞的功能。据报道,环磷酸腺苷（c AMP）是胎盘发育的关键调控因子,但其在胎盘和妊娠并发症中的作用尚不清楚。有研究显示Di O2的表达受c AMP的控制。此外,Di O2是否能以非甲状腺激素代谢介导的方式调节细胞活性尚未得到研究。因此,在本研究旨在探讨在甲状腺激素缺乏的情况下,Di O2在调控滋养细胞命运中的作用,并评估其在早期复发性流产患者胎盘绒毛的表达及其调控的机制。本研究也探讨了Di O2的底物T4及其转化产物T3在调控滋养层细胞命运决定中的作用。材料与方法:采用免疫荧光法分析胎盘绒毛中Di O2的表达。利用过表达Di O2和敲低Di O2的“功能增强”和“功能丧失”实验,研究了在甲状腺激素缺乏的情况下,Di O2对滋养细胞周期、增殖、迁移、侵袭和凋亡的调控作用。在RPMI培养基中加入已去除甲状腺激素的胎牛血清（FBS）培养滋养细胞细胞系和早期胎盘人滋养细胞绒毛;采用CCK8检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡;伤口愈合试验和transwell细胞侵袭试验分别测定细胞迁移和侵袭。采用RT-q PCR检测基因m RNA水平表达;在,western blotting检测蛋白水平表达。结果:Di O2在早期胎盘绒毛的细胞滋养细胞（cytotrophoblast,CTB）、近端滋养细胞（proximal column cytotrophoblast,PCT）、远端滋养细胞（distal column cytotrophoblast,DCT）和合胞滋养细胞（syncytiotrophoblast,STB）中均有表达。过表达Di O2可将滋养层细胞增殖阻滞在G1期、G1/S-特异性周期蛋白-D1（cyclin D1）和增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）表达下调,同时提高了凋亡标志物caspase-3活性和抑制AKT和ERK1/2信号通路促进细胞凋亡。此外,过表达Di O2也上调了细胞间质标志物N-cadherin、vimentin、fascin-1和MMP9及上游转录因子twist-1、snail-1、snail-2、zeb-1、zeb-2和HIF1-α,增强了滋养细胞的迁移和侵袭能力。Di O2的敲低引起了相反的效果。过表达和敲低Di O2均不影响细胞角蛋白-7（CK7）和β-catenin的表达。有趣的是,Di O2的每一种效应都不是由甲状腺激素代谢介导的。早期流产胎盘绒毛检测显示Di O2、WSB1、N-cadherin、vimentin、fascin-1、twist-1表达降低,E-cadherin表达未改变。WSB1的下调导致Di O2上调,滋养细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭减少。T4和T3处理促进细胞增殖、迁移和侵袭并抑制细胞凋亡。结论:在胎盘发育过程中,Di O2可抑制滋养细胞的增殖能力,促进滋养细胞向侵袭性表型分化;它的下调可能与早期流产前的较浅滋养层浸润有关。因此,Di O2是治疗早期复发性流产的潜在靶点。本研究还首次揭示,Di O2并不总是通过甲状腺激素信号传导来发挥作用,而是可以直接靶向转录因子和信号通路来调节细胞活性。本研究还表明,WSB1和T4通过调控Di O2的表达来调节滋养层细胞的活性。Di O2和WSB1可能是研究滋养层发育新的标记之一。