论文部分内容阅读
目的:探讨新型抗菌肽G3KL亚型M166、TNS122对多重耐药大肠埃希菌引起小鼠腹腔感染的生存保护作用以及对腹腔感染小鼠的抗炎效应和肝肾功能影响。将从新的视点为多重耐药菌治疗提供新的思路。方法:1、采用二倍稀释法测定M166、TNS122及泰能对多重耐药大肠埃希菌的最小抑菌浓度,判断药物体外抗菌能力。2、选取Balb/c小鼠,随机分成10组。第1-9组每只小鼠腹腔依次注射浓度为1.00、1.25、1.50……3.00×10~8cfu/ml ESBLs.E.c 0.5ml,第10组注射0.5ml生理盐水作为对照组。观察小鼠24h死亡情况;根据小鼠100%死亡最小致死菌量作为建模浓度。3、选取Balb/c小鼠,随机分成5组,即对照组、模型组、M166实验组、TNS122实验组及泰能实验组,每组10只;成功建模后,实验组腹腔给药TNS122、M166及泰能药物浓度依次为5、5、0.5mg/kg,1/8h。对照组、模型组用氯化钠注射液补足体积。观察各组小鼠48h活动状况,并计算死亡率。4、小鼠分组、建模及给药方式同方法3。各组小鼠腹腔感染1h、6h、10h后,采用摘眼球取血方法收集各组小鼠血液,检测小鼠血液中细菌浓度、炎症因子(IL-6、CRP)、肝肾功(ALT、AST及BUN)水平,分析各药物对腹腔感染小鼠抗炎作用及肝肾功影响。结果:1、通过二倍稀释法得出:泰能、M166、TNS166最小抑菌浓度依次为0.5μg/ml、16μg/ml、8μg/ml。2、各组小鼠腹腔注射不同梯度浓度大肠埃希菌菌液后,各组小鼠活动减少,蜷缩成团,不进食进水;毛发竖立湿潮不整、光泽变淡,眼睑脓性分泌物,大便稀塘等的表现。10h后出现小鼠死亡,大多数死亡集中在12-17h之间,20h后基本不再死亡。根据各组小鼠死亡数量得出:小鼠腹腔感染模型建立浓度为1.75×10~8cfu/ml。3、对照组、TNS122组、M166组、泰能组和模型组小鼠48h存活率依次为:100%、100%、90%、80%、0%。4、各组小鼠腹腔感染药物治疗后不同时间点血液细菌浓度:模型组随时间变化,小鼠血液中细菌浓度越来越高;泰能、M166、TNS122药物治疗后,各组小鼠血菌浓度有所下降。与模型组比较,M166组、TNS122组、泰能组小鼠血菌浓度明显降低;与M166相比,TNS122组及泰能组血菌浓度升高,差异具有明显统计学意义(P<0.05)。药物治疗后1h小鼠IL-6水平:与对照组比较,其他四组小鼠血浆中IL-6水平明显升高;其他四组之间比较无明显差异(P>0.05)。治疗后6h、10h小鼠IL-6水平:与模型组比较,M166组、TNS122组及泰能组小鼠血浆中IL-6水平明显降低;治疗后10h小鼠IL-6水平结果:与M166相比,泰能、TNS122血浆中IL-6升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。模型组及实验组中,小鼠肝功ALT、AST在腹腔感染1h变化不明显,各组小鼠血浆中ALT、AST两两比较无明显差异(P>0.05)。在腹腔感染6h时,AST水平:与对照组、模型组、泰能组相比,M166组、TNS122组小鼠血浆中AST水平明显升高。在腹腔感染10h时,小鼠血液中ALT水平:与TNS122组比较,其他各组ALT水平明显降低;AST水平:与对照组、模型组相比,M166组、TNS122组及泰能组小鼠血浆中AST水平明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。不同时间点小鼠血液炎症因子IL-6、CRP检测:模型组,小鼠腹腔感染后随时间变化血液中炎症因子逐渐升高;其他实验组炎症因子随时间变化有不同程度升高或降低。与对照组相比,其他四组IL-6、CRP升高;1h检测各实验组IL-6、CRP水平,组间比较无明显差异(P>0.05);小鼠腹腔感染6h、10h检测IL-6、CRP水平:与模型组比较,实验组IL-6、CRP水平明显降低;小鼠腹腔感染10h后,与M166组相比,TNS122组、泰能组IL-6、CRP水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。不同时间点小鼠血浆BUN水平:各组小鼠BUN比较无明显差异(P>0.05)。结论:1、新型抗菌肽G3KL亚型M166、TNS122在体对ESBLs.E.c外具有抗菌作用;2、M166、TNS122可降低小鼠腹腔感染死亡率,具有生存保护作用;3、M166、TNS122可降低腹腔感染小鼠血液中炎症因子IL-6、CRP水平,减轻炎症反应;4、M166、TNS122对小鼠肝功能可能存在毒副反应。