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研究目的 本文旨在通过研究体内肝脏中二氢嘧啶脱氢酶(Liver-DPD)、外周血单个核细胞中DPD(PBMC-DPD)以及血浆及尿中二氢尿嘧啶／尿嘧啶比值(UH2／Ura值)的时辰变化规律，并比较它们在时辰变化规律上的异同，从而可以用于指导时辰给药方案的设计和调整，并为探讨体液UH2／Ura值能否全面反映体内DPD活性的变化提供数据。本文还通过研究5-氟尿嘧啶(5-FU)和氟尿苷(FUDR)在患者体内的药代动力学特征、临床疗效和毒性反应，考察体液UH2／Ura基础值在临床上能否全面客观地反映氟嘧啶类化疗药物的体内代谢以及疗效和毒性，从而为体液中UH2／Ura基础值作为氟嘧啶类药物临床化疗时疗效和毒性的预评价指标提供依据，也为这个指标应用到指导个体化用药剂量提供依据。 研究方法 论文实验部分由五部分组成： 一、将氟尿嘧啶(5-FU，20mg／kg／h)经Sprague-Dawley大鼠(n=12)尾静脉恒速推注8h，对照组(n=12)不给药。采集实验组和对照组动物不同时辰下的肝脏和全血样本，制备肝匀浆并分离PBMC。应用酶联免疫吸附分析(ELISA)法测定肝脏组织和PBMC中DPD活性。实验还采集了6名成年健康受试者(不给药)不同时辰下的全血标本，采用相同方法分离PBMC并测定其中的DPD活性。应用“Cosinor”法分析DPD活性的时辰变化规律，比较Liver-DPD与PBMC-DPD时辰变化规律的异同，同时考察5-FU对体内DPD活性的影响作用，为指导时辰给药方案的设计和调整以及揭示UH2／Ura时辰变化规律与DPD时辰变化规律的一致性方面提供数据。 二、应用半定量反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)方法测定第一部分实验中不同时辰下大鼠肝脏和PBMC以及健康受试者PBMC中DPD-mRNA的相对水平，并用“Cosinor”法分析了各自的DPD-mRNA水平的时辰变化规律，应用Pearson相关分析比较了Liver／PBMC中DPD-mRNA与相应的DPD蛋白活性，为进一步揭示体内DPD活性和UH2／Ura值时辰变化的产生机制提供参考。 三、应用高效液相色谱-串联质谱(HPLC／MS／MS)法测定第一部分实验中不同时辰下大鼠血浆和尿中的UH2／Ura值，并收集55名健康受试者在不同时段内的尿样(7天后，选取其中的12名男性健康受试者，按相同的方法收集不同时间段的尿样，用于验证UH2／Ura值时辰变化规律的日间重复性)，同时采集其中12名男性受试者不同时辰