论文部分内容阅读
邻苯二甲酸二异丁酯属于塑化剂(PES)邻苯二甲酸酯类,作为工业材料加工助剂。于1950后大量应用于塑料制品的加工,主要用于增强材料的延展性、耐久性等加工性能。在缺乏相对完善的毒理学研究的情况下,添加了塑化剂的塑料制品大量地应用到食品包装行业、玩具业、医疗器械和家庭常用用品方面。近年来,大量的毒理学研究表明:塑化剂邻苯二甲酸二异丁酯是一类环境雌性激素,这类物质进入人体后,可以影响人体正常分泌物的合成,释放,转运,结合等过程,进而阻碍人体的正常发育。因此,建立其免疫分析方法来实现快速检测食品中的二异丁酯污染具有十分重要的意义。目前邻苯二甲酸二异丁酯的检测手段主要有高效液相色谱、气相色谱,往往这些色谱分析方法和质谱联用。这类分析方法虽然可以很准确地测量出水或食品中邻苯二甲酸二异丁酯含量且检测限较低,但这类分析方法分析时间长、所需仪器昂贵、需要专业的人员进行分析操作且无法实现大批样品的快速检测。因此,很有必要开发一种简单、快速、可靠、灵敏、廉价的检测邻苯二甲酸二异丁酯的方法。免疫分析具有方便、成本低、灵敏度高等优点可以满足简单、快速检测邻苯二甲酸二异丁酯的检测要求。本文通过邻苯二甲酸结构类似物4-硝基邻苯二甲酸作为中间体,经过羧基酯化和硝基还原来获得具有邻苯二甲酸二异丁酯结构特征、同时得到可修饰氨基。再将得到的目标分子结构衍生物采用氨基重氮化与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)、鸡血清白蛋白(OVA)偶联分别制得免疫原和包被原。免疫抗原注射免疫新西兰兔,制备多克隆抗体,利用高灵敏度抗体建立塑化剂邻苯二甲酸二异丁酯的免疫分析方法。利用邻苯二甲酸二异丁酯多克隆抗体建立间接竞争荧光免疫分析方法,经过分析条件的优化,分析方法的线性范围为10.47~357.06 ng/mL(R2=0.991),检测限为5.82ng/mL。将建立的分析方法应用到植物油样品中邻苯二甲酸二异丁酯的检测,一方面该方法的样品加标回收率为79-102%,另一方面利用该方法测得的油样邻苯二甲酸二异丁酯含量与传统GC-MS结果相关度较高,表明该方法适用于食品中塑化剂邻苯二甲酸二异丁酯的检测。