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目的
检测含有不同含量亚微米β-磷酸三钙(β-TCP)的细菌纤维素(BC)/丝素蛋白(SF)/β-TCP多孔骨支架的结构、力学性能等理化性质的差异以及生物相容性；体外研究多孔骨支架对小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)的免疫调节作用；探讨亚微米的β-TCP对小鼠RAW264.7细胞的免疫调节作用以及对SD大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的促进作用。
方法
本研究采用冷冻干燥法构建含有不同含量亚微米β-TCP的BC/SF/β-TCP多孔骨支架。首先将细菌纤维素溶液和丝素蛋白溶液均匀混合，两者质量比保持为20/3；在此基础上加入亚微米β-TCP粉末充分混合并分散均匀(混合液中β-TCP浓度依次为0mg/mL、50mg/mL、100mg/mL、150mg/mL；待冷冻干燥后分别记为支架BC/SF、BC/SF/5%β-TCP、BC/SF/10%β-TCP、BC/SF/15%β-TCP)。利用SEM、XRD、万能试验机等手段检测多孔支架的微观结构、弹性模量、吸水性和膨胀性等理化性质。采用CCK-8和Live/Dead实验观察多孔支架的细胞相容性；SD大鼠背部皮下植入评估支架的炎症反应。多孔骨支架与小鼠RAW264.7共培养评估其骨免疫调节作用。亚微米β-TCP干预小鼠RAW264.7细胞和SD大鼠骨髓间充质干细胞，分别评估其骨免疫调节作用及对骨髓间充质干细胞成骨分化的促进能力。
结果
在4种多孔骨支架中，随着β-TCP含量增加，支架的力学性能得到增强，而孔隙率、吸水性和膨胀性逐渐降低，β-TCP粉末逐渐填充支架内部孔隙。CCK8、Live/Dead实验表明支架具有很好的细胞相容性；支架皮下植入后并不会引起严重的炎症反应。BC/SF/15%β-TCP多孔支架组能最大地促进RAW264.7向M2型极化，且能促进分泌成骨成血管因子。亚微米β-TCP能促进RAW264.7向M1、M2极化及分泌调节因子。当不同浓度β-TCP干预SD大鼠骨髓间充质干细胞时，150mg/mL浓度的β-TCP粉末促进成骨的能力更强。
结论
通过冷冻干燥法制备的BC/SF/β-TCP多孔骨支架具有良好的理化性能及生物相容性;此外，它可以调节巨噬细胞的极化，具有免疫调节作用。亚微米β-TCP具有骨免疫调节能力及促进SD大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化作用。
检测含有不同含量亚微米β-磷酸三钙(β-TCP)的细菌纤维素(BC)/丝素蛋白(SF)/β-TCP多孔骨支架的结构、力学性能等理化性质的差异以及生物相容性；体外研究多孔骨支架对小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)的免疫调节作用；探讨亚微米的β-TCP对小鼠RAW264.7细胞的免疫调节作用以及对SD大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的促进作用。
方法
本研究采用冷冻干燥法构建含有不同含量亚微米β-TCP的BC/SF/β-TCP多孔骨支架。首先将细菌纤维素溶液和丝素蛋白溶液均匀混合，两者质量比保持为20/3；在此基础上加入亚微米β-TCP粉末充分混合并分散均匀(混合液中β-TCP浓度依次为0mg/mL、50mg/mL、100mg/mL、150mg/mL；待冷冻干燥后分别记为支架BC/SF、BC/SF/5%β-TCP、BC/SF/10%β-TCP、BC/SF/15%β-TCP)。利用SEM、XRD、万能试验机等手段检测多孔支架的微观结构、弹性模量、吸水性和膨胀性等理化性质。采用CCK-8和Live/Dead实验观察多孔支架的细胞相容性；SD大鼠背部皮下植入评估支架的炎症反应。多孔骨支架与小鼠RAW264.7共培养评估其骨免疫调节作用。亚微米β-TCP干预小鼠RAW264.7细胞和SD大鼠骨髓间充质干细胞，分别评估其骨免疫调节作用及对骨髓间充质干细胞成骨分化的促进能力。
结果
在4种多孔骨支架中，随着β-TCP含量增加，支架的力学性能得到增强，而孔隙率、吸水性和膨胀性逐渐降低，β-TCP粉末逐渐填充支架内部孔隙。CCK8、Live/Dead实验表明支架具有很好的细胞相容性；支架皮下植入后并不会引起严重的炎症反应。BC/SF/15%β-TCP多孔支架组能最大地促进RAW264.7向M2型极化，且能促进分泌成骨成血管因子。亚微米β-TCP能促进RAW264.7向M1、M2极化及分泌调节因子。当不同浓度β-TCP干预SD大鼠骨髓间充质干细胞时，150mg/mL浓度的β-TCP粉末促进成骨的能力更强。
结论
通过冷冻干燥法制备的BC/SF/β-TCP多孔骨支架具有良好的理化性能及生物相容性;此外，它可以调节巨噬细胞的极化，具有免疫调节作用。亚微米β-TCP具有骨免疫调节能力及促进SD大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化作用。