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目的: 干燥综合征(Sj(o)grens Syndrome SS)在我国是一种常见的主要累及外分泌腺体的慢性炎症性自身免疫病。临床上主要表现除了因唾液腺和泪腺受损而出现的口干、眼干外,还有其他外分泌腺以及腺体外其他器官受累而出现多系统损害的症状和体征,患者血清中可出现多种自身抗体。该病在我国人群的发病率为0.3-0.7%,其中以女性患者多见。 目前,干燥综合征的发病机制仍不甚明了,国内外学者对于其的关注热点主要集中在对于细胞凋亡的研究中。Caspase-3及其底物PARP是细胞凋亡中研究的热点。目前对于其二者在干燥综合征患者唇腺组织中的表达在国内外鲜有报道。 本实验通过对干燥综合征患及正常患者唇腺组织的研究来探讨Caspase-3及其底物PARP在干燥综合征患者唇腺组织的表达的临床意义,欲揭示其二者在干燥综合征发病机制中的作用。 方法: 1、采用唇腺活检法收集60例干燥综合征患者唇腺组织作为实验组,收集25例正常唇腺作为对照组。取新鲜标本一部分浸入4%甲醛固定,常规石蜡包埋;另一部分投入液氮,-70℃条件下保存。 2、运用二步法免疫组化(S-P法)检测Caaspase-3在实验组与对照组的唇腺组织中表达的部位。 3、运用western-blot法对实验组及对照组唇腺组织中Caspase-3及其底物PARP进行半定量的检测并分析二者的关系。 4、运用real-timePCR法对实验组及对照组唇腺组织中Caspase-3及其底物PARP进行定量检测同时分析二者的关系。 结果: 1、免疫组化实验结果显示Caspase-3在实验组及对照组中均有表达,其主要表达部位在细胞质,也表达于浸润淋巴细胞、腺泡细胞、间质细胞,在Caspase-3阳性表达明显增强的区域,可见腺体结构被明显破坏,主要表现为细胞核极性消失,导管扩张。 2、Westernblot结果显示SS患者唇腺组织中可检测到Caspase-3蛋白的32KD和17KD的条带及PARP85KD、116KD条带,在实验组与对照组中,cleaved Caspase-3与PARP的含量均表现为相反的关系。 3、Real-time PCR结果显示在Caspase-3在实验组唇腺组织中的含量明显高于对照组,同时在实验组患者唇腺组织中PARP的含量明显少于对照组唇腺组织中的含量。34 结论: 1、Caspase-3在干燥综合征患者唇腺组织中的表达较正常患者唇腺组织高表达而其底物PARP与则相反出现低表达。 2、在干燥综合征患者唇腺组织中Caspase-3被激活后作用于其底物PARP从而促进唇腺组织中细胞凋亡。