斑点叉尾鮰源嗜麦芽寡养单胞菌分离、鉴定与致病机理研究

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斑点叉尾(鱼回)作为一种优良的淡水养殖品种,我国于1984年引进,目前,已推广到30多个省市进行养殖,并在一些省市形成了产业化发展趋势。2004年以来,陆续在四川、重庆、贵州等地发生了一种严重危害斑点叉尾(鱼回)健康养殖的急性流行性传染病,该病具有发病突然,死亡率高,传染快等特点,以体表出现圆形、椭圆形或不规则的褪色斑,腹水、肠炎和后肠的肠套叠为病变特征,已给当地的斑点叉尾(鱼回)养殖带来严重的经济损失。具不完全统计,该病2004年给四川斑点叉尾(鱼回)养殖造成的经济损失在200万左右;而2005年的损失则在800万元以上,许多斑点叉尾(鱼回)养殖户因该病的发生而破产,严重挫伤了广大养殖户的养殖积极性。本试验对其病原学、病理学及致病因子的致病作用等进行了研究,其目的在于搞清该病的病原与致病机理,为养殖生产中有效地诊断和防治该病提供科学依据。 从发生斑点叉尾(鱼回)急性流行性传染病病鱼的肝、肾内分离到致病性的菌株(CCF00024),经人工感染试验证实其为斑点叉尾(鱼回)急性流行性传染病的病原菌。对该菌的形态、生理生化检测表明,其为非发酵型,严格需氧,革兰氏阴性直杆菌,极生多鞭毛,对除麦芽糖和甘露糖以外的多种糖类不利用产酸,氧化酶阴性,DNA酶、蛋白酶、脲酶、赖氨酸脱羧酶阳性,MR、VP阴性,H2S阴性。在以该菌16S rDNA序列(GenBank登录号AY970826)和GenBank内同源性较高的细菌16S rDNA序列构建的系统发育树中,分离菌CCF00024与嗜麦芽寡养单胞菌(S.maltophilia)聚在一簇,其同源性在99.4-99.6%,结合形态和生理生化特点将其鉴定为嗜麦芽寡养单胞菌(S.maltophilia)。药敏实验结果表明磺胺甲噁唑、磺胺异噁唑、阿齐霉素、洛美沙星对其敏感,新霉素、卡那霉素、氨苄青霉素、头孢唑啉、先锋霉素V和链霉素等不敏感。 对斑点叉尾(鱼回)S.maltophilia自然和人工感染进行了系统的病理学研究,结果表明该菌感染斑点叉尾(鱼回)眼观病变主要表现为体表充血、出血和褪色斑,腹部膨大,腹腔内充有淡黄色或带血的腹水,胃肠道粘膜充血、出血,肠腔内充满淡黄色或含血的粘液,肠道发生套叠,甚至肠脱。病理组织学上,肾间质水肿,造血组织坏死,巨噬细胞和中性白细胞浸润,肾小管上皮细胞空泡变性和坏死;肝水肿,狄氏间隙增宽,肝细胞空泡变性及坏死;胃肠道粘膜上皮变性、坏死,脱落,固有膜,粘膜下层水肿,淋巴细胞、巨噬细胞和中性白细胞浸润;脾淤血,出血,淋巴细胞减少,大量巨噬细胞和中性白细胞浸润;骨骼肌变性、坏死,大量中性白细胞和巨噬细胞浸润。细胞病理学上,病鱼主要器官的细胞均有较为严重的损伤,细胞肿胀,超微结构破坏,特别是线粒体和细胞核的损伤很明显。线粒体表现为肿胀,嵴断裂,断裂或溶解消失,呈空囊状;细胞核
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