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目的骨巨细胞瘤(Giant cell tumor of bone,GCTB)是一种交界性骨肿瘤,手术治疗仍是目前最主要的治疗方式,而此类肿瘤很难被彻底治愈,且术后复发的可能性较大,预后较差。细胞自噬对肿瘤细胞的调节起双重作用,一方面细胞自噬可抑制肿瘤的发生和发展,另一方面细胞自噬可促进肿瘤的发生和发展,目前自噬反应对骨巨细胞瘤影响的研究较少,具体发生机制还尚不清楚。很多研究表明mi RNA在多种肿瘤的发生、发展中发挥重要作用,且mi RNA可调控细胞自噬,在调控自噬过程中,大多为抑制细胞自噬发生,也有少部分mi RNA能激活细胞自噬。本研究拟探讨mi RNA-217在骨巨细胞瘤中的表达情况及其对GCT0404自噬的影响,以期探求到一种可能用于骨巨细胞瘤早期诊断、治疗及复发方面的生物标志物,进而更好的为临床诊疗提供指导。方法实验一:体外培养人成骨细胞h FOB1.19和GCT0404细胞,利用定量PCR技术检测成骨细胞h FOB1.19及GCT0404中mi RNA-217的表达水平,最终通过T检验分析两组mi RNA-217的表达是否有统计学差异。实验二:体外培养人GCT0404细胞,进行细胞转染,将其分为NC组、mi RNA-217 mimic组、NC+rapa组、mi RNA-217 mimic+rapa组、inhibitor NC组、mi RNA-217 inhibitor组、inhibitor NC+rapa组、mi RNA-217inhibitor+rapa组,采用定量PCR技术检测上述各组LC3、Atg5、Atg7及Beclin1的m RNA表达情况;利用Western blot技术检测上述各组LC3、Atg5、Atg7及Beclin1的蛋白表达情况;利用流式细胞术检测上述各组NAO染色荧光强度变化;利用透射电镜检测上述各组自噬体形成情况。最终通过T检验比较各个实验组与对照组之间的差异是否显著。结果实验一:mi RNA-217在成骨细胞h FOB1.19中高表达,在GCT0404细胞中表达较低,差异被认为具有统计学意义。实验二:(1)mi RNA-217 mimic组细胞中LC3、Atg5、Atg7、Beclin1的m RNA表达显著低于NC组,差异有统计学意义;NC+rapa、mi RNA-217mimic+rapa、mi RNA-217 inhibitor、inhibitor NC+rapa、mi RNA-217 inhibitor+rapa各组细胞中LC3、Atg5、Atg7、Beclin1的m RNA表达显著高于NC组,差异有统计学意义;inhibitor NC组中LC3、Atg5、Atg7、Beclin1的m RNA表达与NC组差异无统计学意义。(2)mi RNA-217 mimic组细胞中LC3、Atg5、Atg7、Beclin1的蛋白表达显著低于NC组,差异有统计学意义;NC+rapa、mi RNA-217 mimic+rapa、mi RNA-217 inhibitor、inhibitor NC+rapa、mi RNA-217 inhibitor+rapa各组细胞中LC3、Atg5、Atg7、Beclin1的蛋白表达显著高于NC组,差异有统计学意义;inhibitor NC组中LC3、Atg5、Atg7、Beclin1的蛋白表达与NC组差异无统计学意义。(3)mi RNA-217 mimic、NC+rapa、mi RNA-217 mimic+rapa、mi RNA-217 inhibitor、inhibitor NC+rapa、mi RNA-217inhibitor+rapa各组与NC组的NAO荧光强度差异有统计学意义,inhibitor NC组与NC组的NAO荧光强度差异被认为无统计学意义。(4)透射电镜检测发现mi RNA-217抑制自噬小体形成,mi RNA-217表达下调时,促进细胞自噬。结论(1)人GCT0404细胞中mi RNA-217表达水平显著下调。(2)过表达mi RNA-217的人GCT0404细胞中自噬基因相关m RNA及蛋白表达显著下调,mi RNA-217抑制人GCT0404细胞中自噬小体形成,过表达mi RNA-217能够抑制GCT0404细胞自噬。