【摘 要】
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目的:研究综合康复干预对膝关节固定诱导的肌肉萎缩大鼠的炎症反应、细胞凋亡及PI3K/Akt/mTOR信号通路的作用。方法:取45只Wistar大鼠分为正常对照组（n=8）及造模组（n=37）,选用Nagai法将造模组大鼠制成左后肢废用性肌萎缩（DMA）模型,并固定3周。于固定3周后,随机抽取3只大鼠处死并取腓肠肌组织做HE染色以验证固定3周后肌肉萎缩是否成立;HE染色结果提示,此时DMA模型已成立
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目的:研究综合康复干预对膝关节固定诱导的肌肉萎缩大鼠的炎症反应、细胞凋亡及PI3K/Akt/mTOR信号通路的作用。方法:取45只Wistar大鼠分为正常对照组（n=8）及造模组（n=37）,选用Nagai法将造模组大鼠制成左后肢废用性肌萎缩（DMA）模型,并固定3周。于固定3周后,随机抽取3只大鼠处死并取腓肠肌组织做HE染色以验证固定3周后肌肉萎缩是否成立;HE染色结果提示,此时DMA模型已成立,并取出剩余大鼠的关节固定装置,并在X线下排除骨折大鼠。采用随机数字表法将剩余的DMA模型成功大鼠分为模型对照组（MC组）、运动干预组（EX组）、中药松弛膏组（SC组）及综合康复干预组（CR组）,每组8只大鼠。MC组大鼠不给予任何干预;EX组大鼠给予跑台训练（跑台速度为18 m/min）,每天训练1次,每次20min,每周训练6 d;SC组大鼠给予中药松弛膏局部涂抹并徒手按摩,每天治疗1次,每周治疗6 d;CR组大鼠先给予跑台训练（同EX组）,再给予中药松弛膏局部涂抹并徒手按摩（同SC组）,每天治疗1次,每周治疗6 d,干预前及干预后每一周定时测定各组大鼠四肢抓力。于干预6周后,用2%的戊巴比妥钠麻醉大鼠,等麻醉满意后采用腹主动脉采血的方法采血并收集血清样本,此后立刻用脱臼的方法处死大鼠,完整剥离出腓肠肌及比目鱼肌组织。再采用H＆E染色法、ELISA、TUNEL、q RT-PCR、Western blot等实验技术,检测各组大鼠肌肉（mg）/体重（g）比、肌肉组织病理改变、肌纤维横截面积、大鼠血清中炎性因子的表达量、凋亡阳性率、PI3K/Akt/mTOR m RNA表达及蛋白表达等情况。结果:干预后每组DMA大鼠四肢抓力随着干预天数增加有所改善,CR组大鼠抓力较EX组、SC组、CR组均有统计学意义（P＜0.05）;EX组、SC组、CR组大鼠肌肉（mg）/体重（g）比较MC组均有统计学意义（P＜0.05）,但组间比较无统计学差异（P＞0.05）。HE染色结果提示,MC组肌纤维排列紊乱,有大量炎性细胞浸润,CR组肌纤维排列紊乱、炎性细胞浸润等病理状态均显著缓解;干预结束后CR组肌纤维横截面积较MC组、EX组及SC组显著增高（P＜0.05）,EX组、SC组、CR组两两比较均有统计学差异（P＜0.05）。CR组炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6含量均较MC组、EX组及SC组显著降低（P＜0.05）,抗炎因子IL-10含量较MC组、EX组及SC组明显增加（P＜0.05）;MC组凋亡阳性率为（25.86±1.499）%,较NC组显著升高（P＜0.05）,EX组凋亡阳性率较MC组比较无统计差异,SC组、CR组较MC组比较均有统计学差异（P＜0.05）,其中CR组凋亡阳性率最低。另外CR组PI3K、Akt、mTOR m RNA水平及蛋白含量亦较MC组、EX组明显增加（P＜0.05）。结论:综合康复干预通过促进骨骼肌蛋白质合成,来抑制骨骼肌细胞凋亡,同时减轻炎症反应、促进肌力恢复等多种途径对DMA起到保护性作用。
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