能源甜菜发酵生产酒精的条件优化

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实验分三部分对能源甜菜原料生产酒精的工艺进行了研究,第一部分为固态发酵,主要研究了影响固态发酵的各个单因素。第二部分为固定化发酵,重点研究了利用壳聚糖-海藻酸钠做为固定化载体时,固定化酵母菌种的制备条件以及固定化酵母菌种的最佳发酵条件。第三部分是通过响应面法对南阳酿酒酵母菌种CICC1308-1的固定化发酵培养基进行优化。通过以上实验,筛选出最适的发酵酒精的菌种,并选择最佳的发酵方式,最大限度的提高酒精产率,进一步为工业化生产提供依据。首先,确定了能源甜菜固态发酵生产酒精的最佳条件:在对发酵培养基灭菌后,添加10g/L的KH2PO4,发酵温度为30~31℃,发酵时间为40h左右,接菌量为15-20mL之间,初始pH为自然pH,料水比1:3.0时,发酵的效果比较好,酒精转化率最高。ADY菌种活化时间60~90 min之间,0.10%(质量分数)的ADY使用量是合理的,能够达到理想的酒精转化率。虽然纤维素酶的使用对能源甜菜的浓醪发酵有一定的促进作用,但是综合考虑到纤维素酶的使用将增加能源甜菜发酵生产成本的因素,本工艺不选择将纤维素酶作为提高酒精产率的手段。其次,在利用壳聚糖-海藻酸钠作为固定化载体固定酿酒酵母进行发酵研究中,得出壳聚糖-海藻酸钠固定化小球的制备优化工艺条件为:海藻酸钠浓度为4%、固定化时间为4h、壳聚糖浓度为0.9-1.2%和覆膜时间为20min,此条件下固定化小球硬度最大。研究表明壳聚糖-海藻酸钠固定化小球具有良好的耐泡性,耐热性。壳聚糖-海藻酸钠固定化小球进行酒精发酵时的单因素发酵条件为:海藻酸钠浓度为4%,最适温度在30℃~35℃之间,填充量选择0.25g/mL,壳聚糖浓度最适量可以选择0.9%,这样的发酵效果最好,酒精转化率最高。在此条件下将包含有酿酒酵母菌种的壳聚糖-海藻酸钠固定化小球放入发酵罐中发酵,结果表明固定化载体可以保持酵母活力,重复使用,有利于运用在连续生产中。第三,通过响应面法对南阳酿酒酵母菌种CICC1308-1的固定化发酵培养基进行优化研究得到如下结论:(1)应用Plackett-Burman设计筛选出影响固定化发酵产酒精的主要因素为海藻酸钠浓度,底物浓度与发酵温度。(2)响应面分析试验方法对固定化发酵酒精得出重要因素回归方程:Y1=84.5940-0.7565X1+0.1366X5-0.9020X8-0.3293X1X1-0.2232X5X5+0.5591X8X8-0.1500X1X5-0.0250X1X8-0.1750X5X8(X1底物浓度;X5海藻酸钠浓度;X8发酵温度)即底物浓度为12%,海藻酸钠浓度为4%,发酵温度31℃
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