赣南脐橙皮中精油和黄酮的联合提取与分离

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脐橙(Citrus sinensis Osbeck)是一种优质水果,含有人体所必需的各类营养成分。目前,我国脐橙的消费方式以鲜食和橙汁加工为主,而对脐橙皮渣的综合利用研究还不够,大量皮渣既是对资源的浪费亦是环境的重要污染源之一。因此,本课题以赣南脐橙为原料,同时提取橙皮中的精油和橙皮苷,并对其成分含量和活性进行分析评价,为综合开发赣南脐橙皮提供理论基础和技术支撑。1、分别使用水蒸气蒸馏法(HD)、同时蒸馏萃取法(SDE)和顶空固相微萃取法(HS-SPME)提取赣南脐橙皮挥发性物质,通过气相保留指数、气相色谱质谱联用技术(GC-MS)对挥发性成分进行定性与定量分析。首次对三种方法提取脐橙皮挥发性成分的异同进行整体的分析、比较,并对各方法提取脐橙皮挥发性物质的提取效果进行评价。3种方法提取赣南脐橙皮挥发性物质,分别鉴定出化合物41种(HD)、39种(SDE)、48种(HS-SPME),主要是醇类和烯类物质,其中大部分是萜类物质。柠檬烯均是HD精油、SDE挥发油、HS-SPME挥发性物质中含量最高的组分,SDE挥发油与HD精油的其他组分品种相似且含量也差异不大,HS-SPME挥发性物质与挥发油、精油的主要化合物品种及含量差异相对较大。HS-SPME虽不利于高沸点化合物的提取,但其处理时间短,能将橙皮中挥发性成分及组成真实反映出来;HD由于提取时间长,过长的氧化时间加深了易被氧化的物质被氧化的程度;SDE提取挥发油中低沸点化合物较少,但能有效提取橙皮挥发性物质中具代表性的成分。综合考虑,将HS-SPME和SDE结合使用分析赣南脐橙皮挥发性物质,可达到满意的分析效果。此外,对脐橙皮挥发油的提取方法进行了工艺优化,对比了HD精油和SDE挥发油的得率和感官品质,从而确定了从脐橙皮中提取精油的最适方法。HD提取精油的最佳条件是:橙皮打浆处理、液料比为1:2.5(g/mL)、提取120min,此时精油的得率为3.15%。SDE提取挥发油的最佳条件是:橙皮打浆处理、液料比为1:2.0(g/mL),提取180min,此时挥发油的得率为3.47%。由于水蒸气蒸馏法提取的精油感官品质比同时蒸馏萃取法提取的挥发油更好且提取时间短,综合考虑,使用水蒸气蒸馏法提取赣南脐橙皮精油。2、采用酶法-超声辅助萃取从提取精油后的橙皮渣中的提取黄酮,结果表明最佳的提取工艺为:复合酶(m(纤维素酶)∶m(果胶酶)=2:1)加酶量0.92%(以皮渣的干重计),酶解pH4.5,酶解温度50℃,酶解时间2.5h,乙醇浓度50%,料液比1:3(9g/mL),超声时间22min,超声功率255.6W,超声温度60℃,在此工艺条件下黄酮得率为11.71%,黄酮得率明显优于现有的乙醇浸提法(7.71%)、超声辅助萃取法(10.78%)和酶法辅助提取(10.32%)。3、采用AB-8大孔吸附树脂纯化酶法超声辅助萃取所得黄酮,确定了AB-8大孔吸附树脂纯化橙皮苷的最佳分离工艺:120mL预处理后的AB-8树脂装入φ25×500mm的树脂柱中,浓度为1.00mg/mL的脐橙皮黄酮粗提物水解液,以流速2BV/h上样达到吸附饱和后,先用4BV去离子水冲洗树脂柱洗去水溶性杂质,再用4BV10%乙醇冲洗树脂柱洗去低浓度醇溶杂质,最后用7BV的70%乙醇溶液洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,50℃真空干燥,得到纯化后的橙皮苷,所得橙皮苷纯度为92.60%。
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