【摘 要】
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目的:观察脱嚷呤/脱嘧啶核酸内切酶（apurinic/apyrimidnic endodeoxyribonuclease 1,APEX1）在年龄相关性白内障（age-related cataract,ARC）不同晶状体混浊类型的房水、前囊膜与血清中的蛋白表达分布与水平变化。围绕APEX1/HIF-1α/VEGF-A轴在年龄相关性白内障中发挥的作用进行初步探讨。实验方法:1.收集2021年7月至20
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目的:观察脱嚷呤/脱嘧啶核酸内切酶（apurinic/apyrimidnic endodeoxyribonuclease 1,APEX1）在年龄相关性白内障（age-related cataract,ARC）不同晶状体混浊类型的房水、前囊膜与血清中的蛋白表达分布与水平变化。围绕APEX1/HIF-1α/VEGF-A轴在年龄相关性白内障中发挥的作用进行初步探讨。实验方法:1.收集2021年7月至2021年12月于苏州大学附属第二医院就诊,被诊断为年龄相关性白内障,并行白内障手术治疗的患者。收集患者的眼部临床资料、房水、晶状体前囊膜及外周静脉血。按照是否合并糖尿病被分为合并糖尿病组与未合并糖尿病组。其中,合并糖尿病组细分为无糖尿病视网膜病变组与糖尿病视网膜病变组;未合并糖尿病组按照晶状体混浊类型被细分为核型白内障组、皮质型白内障组、后囊下型白内障组与混合型白内障组。2.应用免疫荧光技术观察APEX1蛋白在不同组别的年龄相关性白内障患者晶状体上皮细胞（Lens epithelial cells,LECs）中的分布定位与荧光强度。3.利用蛋白印迹实验（Western blot）检测APEX1蛋白在不同类型的年龄相关性白内障患者房水、前囊膜、血清中的定量表达,并比较各组蛋白表达的差异。4.通过酶联免疫吸附测定方法（ELISA）分析HIF-1α与VEGF-A在不同分型的年龄相关性白内障患者房水、血清中的定量表达,并利用简单线性相关分析研究APEX1、HIF-1α、VEGF-A之间的表达趋势和相关性。结果:1.免疫荧光染色结果:不同类型的年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中均有APEX1的表达,并主要在细胞核内表达。在合并糖尿病组中,糖尿病视网膜病变组比无糖尿病视网膜病变组表现为更多的细胞质染色与更高的荧光强度;在未合并糖尿病组中,核型白内障、皮质型白内障相比后囊下型白内障与混合型白内障都呈现出更显著的细胞质染色与荧光强度。2.蛋白印迹结果:不同类型的年龄相关性白内障房水、前囊膜、血清样本中,APEX1表达量不全相等。其中,糖尿病视网膜病变组显著高于无糖尿病性视网膜病变组（P＜0.05）;未合并糖尿病的年龄相关性白内障组别中,组间蛋白表达量呈现差异性表达（P＜0.05）,表现为核型白内障、皮质型白内障表达量较高,后囊下型白内障表达量较低,而混合型白内障表达量介于三组之间。3.酶联免疫吸附测定结果:不同类型的年龄相关性白内障房水、血清样本中,HIF-1α与VEGF-A表达量不全相等。在合并糖尿病的病例组中,无糖尿病性视网膜病变组表达量低于糖尿病视网膜病变组,且差异具有显著性（P＜0.05）;未合并糖尿病的年龄相关性白内障组别中,虽然组间蛋白表达量并无统计学差异（P＞0.05）,但是却呈现出核型白内障、皮质型白内障高表达,后囊下型白内障低表达,与混合型白内障中等表达的趋势。4.通过对APEX1、HIF-1α与VEGF-A在不同类型年龄相关性白内障房水、血清中表达量的简单线性相关分析发现,APEX1/HIF-1α、APEX1/VEGF-A与HIF-1α/VEGF-A两两之间均呈现为显著的正相关关系;且APEX1/HIF-1α、APEX1/VEGF-A在合并糖尿病组的相关系数呈现为强相关,均大于未合并糖尿病组的中等相关关系。结论:1.不同类型年龄相关性白内障患者的晶状体上皮细胞中均存在APEX1的表达,且主要分布在细胞核内。2.APEX1的表达水平在不同类型的年龄相关性白内障患者的房水、前囊膜与血清中存在差异。3.APEX1在年龄相关性白内障患者的房水、前囊膜与血清中具有相近的表达趋势,提示在病理状态下,或可通过全身氧化应激的状态推测眼晶状体氧化应激的状态。4.HIF-1α与VEGF-A的表达水平在不同类型的年龄相关性白内障患者的房水与血清中存在差异。5.APEX1可能通过HIF-1α/VEGF-A轴参与年龄相关性白内障的生理、病理代谢过程。6.APEX1/HIF-1α/VEGF-A轴在不同的晶状体混浊类型中存在不同的通路敏感性。
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