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昆虫病原真菌广泛的存在于自然界,并且分布在多种生态系统中。在全球范围内,从北极到热带地区都有昆虫病原真菌的分布。它们在控制自然虫害方面有应用普遍与广泛之特点,具有相当大的应用潜力与发展前景。在近二十年的时间内,对杀虫真菌的研究取得了许多新进展,也使得昆虫病原真菌成为真菌类生防制剂的重要组成部分。如果将昆虫病原真菌作为高效杀除害虫的生防剂来应用,就需要在田间施用中能够维持其孢子的活力与毒力。高温高渗、太阳紫外辐射以及杀真菌喷雾剂这些田间施用环境,对于细胞的生存活力以及致病侵染力都是不利的,从而抑制了真菌生防剂的稳定性以及对害虫的控制力。因此这就需要我们从各个方面研究与改进真菌生防剂。绿僵菌属种类的昆虫病原真菌作为对环境无害的杀虫剂,相比于化学杀虫剂具有较大的优势,同时也可把它作为一种模式系统,用来研究昆虫-真菌的相互作用,并作为生物技术的基因资源。 已知绿僵菌对逆境的耐受性对于其生产以及应用的重要性,而ENA ATPase通过大量的研究已经发现它可以对高渗透压的逆境产生应答,也发现它可能与一些与逆境相关的通路有联系,即HOG pathway、Ca2+调控通路、TOR通路等MAPK通路,这些通路中的许多节点基因都与ENA1相关,它们之间也存在着维持平衡、相互影响的关系。但这些研究大都在酵母中、人类病原真菌、苔藓植物中进行,至今没有昆虫病原真菌中ENA1基因的相关研究与报导,因此我们的研究为发现其在昆虫病原真菌中的功能提供了可能与证据,并有助于用分子生物学与基因工程的手段实现对绿僵菌菌株的改造。 本文的实验研究结果为: ①MaENA1不影响绿僵菌的正常生长、萌发率、产孢量、毒力;以及细胞壁完整性、抗氧化还原能力、对K+的耐受性、对非离子渗透压的耐受性无影响; ②MaENA1专一的影响绿僵菌对Na+的耐受性,并且在转录水平上,Na+存在条件下,MaENA1表达量显著上调; ③MaENA1显著影响绿僵菌孢子对高温以及紫外辐射(UV-B)的耐受性; ④MaENA1通过MAPK信号通路、cAMP信号通路、RIM101信号通路等多重级联,还有一些其它基因与氧化还原、离子绑定、染色体DNA修复相关,一些其他元件如:CYPs(cytochrome P450 superfamily)、MFS transporters、ABC transporters等复杂调控来影响绿僵菌孢子对Na+、高温、UV-B的耐受性。