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1.背景与目的
心血管疾病(Cardiovascular diease，CVD)是目前影响人类健康的最重大慢性疾病之一，就慢性疾病而言，全球近50%的人口死于CVD。慢性心力衰竭(chronic heart failure，CHF)是多种原因导致心脏结构和/或功能的异常改变，使心室收缩和/或舒张功能发生障碍，从而引起的一组复杂临床综合征，主要表现为体循环、肺循环淤血。CHF是各类心血管疾病的严重表现和晚期阶段，也是各种心脏病进展的最终结局，死亡率和再住院率居高不下。CHF已是发达国家、并逐渐成为发展中国家的沉重医疗负担。
人类基因组中，只有少于2%的基因被转录为可以编码蛋白质的RNA，剩下约98%的转录本不能编码成熟的蛋白质，即非编码RNA(ncRNA)。ncRNA包含的种类较多，目前功能已知的主要有核内小RNA(snRNA)、小核仁RNA(snoRNA)、核糖体RNA(rRNA)、转运RNA(tRNA)、短链非编码RNA(miRNA)和长链非编码核糖核酸(lncRNA)等。miRNA是长度大约为19-24个核苷酸的单链非编码小分子RNA，主要通过与靶基因完全或不完全的碱基配对，参与转录后基因表达调控抑制mRNA翻译或影响其稳定性，从而调控基因的表达，目前miRNA的功能已被广泛研究，并且发现其表达量异常与多种心血管疾病相关。功能未知同时作为当今RNA研究领域热点的主要是lncRNA。lncRNA占ncRNA中的大部分，其位于细胞质或细胞核内，是一类长度超过200nt的功能性RNA分子，被广泛转录于真核细胞内，但不具有蛋白编码的功能，过去被认为是RNA聚合酶Ⅱ转录的副产物，无具体的生物学功能。然而随着DNA测序技术的迅速发展，全基因组转录体的研究表明，lncRNA在各种生物进程中发挥调控作用，逐渐成为近年来研究的热点领域，但相关调控机制的研究才刚刚开始。最近相关研究表明，lncRNA在血液中常常形成更稳定的二级结构，并且可以在体液(如血液、尿液)及心脏组织中容易被检测到，检测方法具有简单、经济、方便等特点，这为lncRNA成为临床上诊疗各种疾病的新的生物学标志物提供可能。越来越多的研究发现lncRNA参与表观遗传学、转录以及转录后等多种生物过程来调控基因表达。近年来，大量研究表明lncRNA的表达水平差异与许多心血管疾病(如冠心病、心律失常、心力衰竭等)的发生发展有关，有可能成为心脏疾病的新型诊断生物标记物及药物治疗靶点。
lncRNA-ROR位于人类染色体18q21.31,全长2.6kb,由四个外显子构成，又称lincRNA-ST8SIA3。lncRNA-ROR是对细胞重编程过程具有重要调控作用的非编码RNA，在诱导多能性干细胞形成过程中发挥重要的作用。早期关于lncRNA-ROR的研究发现其与肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭迁移、血管形成等密切相关，在一些肿瘤疾病中高表达，可能起到致癌基因的作用。研究结果表明lncRNA-ROR通过与蛋白hnRNP1相互作用，能够调控DNA损伤后细胞p53的表达，抑制p53在氧化应激诱导细胞凋亡的作用。Jiang等发现lncRNA-ROR在小鼠心力衰竭模型及培养的肥大心肌细胞中表达明显上调，具有促进心肌肥厚的作用，同时检测到ANP、BNP等心力衰竭指标明显升高。然而关于lncRNA-ROR在心力衰竭方面的研究鲜有报道。那么lncRNA-ROR在CHF患者血清中表达量是否升高呢？其表达量是否随心力衰竭程度加重而变化呢？其表达量与心衰指标相关性如何呢？本研究通过检测正常对照组和CHF患者组血清中lncRNA-ROR的表达，进一步分析CHF患者中lncRNA-ROR的表达水平及与心功能指标的关系。
2.资料与方法
研究对象：选取2017年1月至2018年5月在郑州大学第二附属医院心血管内科接受诊治的109例CHF患者，依据《中国心力衰竭诊断和治疗指南2014》作为诊断标准，作为慢性心力衰竭组(59.76±6.67岁)，其中男性64例、女性45例，并且按照NYHA心功能分级，分为Ⅰ级-Ⅳ级，其中Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级分别为28例、30例、27例和24例。选取同期健康体检者25例为对照组(61.05±4.35岁)，其中男性13例、女性12例。资料的收集及处理：一般信息的采集：由护理人员采集患者的一般信息并记录成表，包括患者的年龄、性别、烟酒史、血压等样本收集，采集两组受试者清晨空腹肘静脉血5ml，即刻用真空采血管采集静脉血静置于4℃冷藏30min后，室温下3000rpm离心15min，留取上层血清，置于-80℃冰箱备用。由本院检验科采用全自动生化分析仪测定患者的血糖、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯、丙氨酸氨基转移酶、肌酐、尿酸等生化指标。实时荧光定量聚合酶链式反应(Quantitative Real-time PCR)检测lncRNA-ROR在慢性心衰组和对照组中表达水平。彩色多普勒超声心动图检查患者左心室射血分数(LVEF)和左心室舒张末期内径(LVEDD)。取研究对象入院第二日清晨空腹血，采用南京市基蛋公司生产的免疫定量分析仪测量N末端B型利钠肽前体(NT-pro BNP)。统计学方法：采用SPSS21.0统计学进行数据分析。对计量资料进行正态性检验和方差齐性检验，符合正态分布时，采用((x)±s)表示，采用t检验进行两组间比较，采用单因素方差分析进行多组间比较。lncRNA-ROR与各临床基本资料之间的关系采用Chi-Square检验，lncRNA-ROR与心功能指标的相关性采用pearson分析。以P<0.05为差异具有统计学意义。
3.结果
(1)两组间年龄、性别、是否高血压、是否高血糖、是否吸烟，总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯、丙氨酸氨基转移酶、肌酐、尿酸，差异均无统计学意义(P＞0.05)。
(2)慢性心衰组患者血清中lncRNA-ROR表达水平、左心室射血分数、N末端B型利钠肽前体和左心室舒张末期内径与对照组比较，差异均有统计学意义(P＜0.05)。
(3)慢性心衰组中不同心功能分级亚组间进行单因素方差分析显示：随着心功能分级增高，左心室射血分数降低，左心室舒张末期内径、血清lncRNA-ROR表达水平和N末端B型利钠肽前体均升高，差异均有统计学意义(P＜0.05)。
(4)慢性心衰组患者血清lncRNA-ROR表达水平与其他因素进行Pearson相关分析显示，慢性心衰患者血清中lncRNA-ROR表达水平与左心室射血分数呈负相关(P＜0.05)，与心功能分级、N末端B型利钠肽前体和左心室舒张末期内径呈正相关(P＜0.05)。
4.结论
(1)血清lncRNA-ROR可能作为诊断CHF的新型生物学标志物。
(2)血清lncRNA-ROR的表达水平可能间接反映CHF患者病情的严重程度，这提示其可能作为评估CHF患者病情变化的理论依据。
心血管疾病(Cardiovascular diease，CVD)是目前影响人类健康的最重大慢性疾病之一，就慢性疾病而言，全球近50%的人口死于CVD。慢性心力衰竭(chronic heart failure，CHF)是多种原因导致心脏结构和/或功能的异常改变，使心室收缩和/或舒张功能发生障碍，从而引起的一组复杂临床综合征，主要表现为体循环、肺循环淤血。CHF是各类心血管疾病的严重表现和晚期阶段，也是各种心脏病进展的最终结局，死亡率和再住院率居高不下。CHF已是发达国家、并逐渐成为发展中国家的沉重医疗负担。
人类基因组中，只有少于2%的基因被转录为可以编码蛋白质的RNA，剩下约98%的转录本不能编码成熟的蛋白质，即非编码RNA(ncRNA)。ncRNA包含的种类较多，目前功能已知的主要有核内小RNA(snRNA)、小核仁RNA(snoRNA)、核糖体RNA(rRNA)、转运RNA(tRNA)、短链非编码RNA(miRNA)和长链非编码核糖核酸(lncRNA)等。miRNA是长度大约为19-24个核苷酸的单链非编码小分子RNA，主要通过与靶基因完全或不完全的碱基配对，参与转录后基因表达调控抑制mRNA翻译或影响其稳定性，从而调控基因的表达，目前miRNA的功能已被广泛研究，并且发现其表达量异常与多种心血管疾病相关。功能未知同时作为当今RNA研究领域热点的主要是lncRNA。lncRNA占ncRNA中的大部分，其位于细胞质或细胞核内，是一类长度超过200nt的功能性RNA分子，被广泛转录于真核细胞内，但不具有蛋白编码的功能，过去被认为是RNA聚合酶Ⅱ转录的副产物，无具体的生物学功能。然而随着DNA测序技术的迅速发展，全基因组转录体的研究表明，lncRNA在各种生物进程中发挥调控作用，逐渐成为近年来研究的热点领域，但相关调控机制的研究才刚刚开始。最近相关研究表明，lncRNA在血液中常常形成更稳定的二级结构，并且可以在体液(如血液、尿液)及心脏组织中容易被检测到，检测方法具有简单、经济、方便等特点，这为lncRNA成为临床上诊疗各种疾病的新的生物学标志物提供可能。越来越多的研究发现lncRNA参与表观遗传学、转录以及转录后等多种生物过程来调控基因表达。近年来，大量研究表明lncRNA的表达水平差异与许多心血管疾病(如冠心病、心律失常、心力衰竭等)的发生发展有关，有可能成为心脏疾病的新型诊断生物标记物及药物治疗靶点。
lncRNA-ROR位于人类染色体18q21.31,全长2.6kb,由四个外显子构成，又称lincRNA-ST8SIA3。lncRNA-ROR是对细胞重编程过程具有重要调控作用的非编码RNA，在诱导多能性干细胞形成过程中发挥重要的作用。早期关于lncRNA-ROR的研究发现其与肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭迁移、血管形成等密切相关，在一些肿瘤疾病中高表达，可能起到致癌基因的作用。研究结果表明lncRNA-ROR通过与蛋白hnRNP1相互作用，能够调控DNA损伤后细胞p53的表达，抑制p53在氧化应激诱导细胞凋亡的作用。Jiang等发现lncRNA-ROR在小鼠心力衰竭模型及培养的肥大心肌细胞中表达明显上调，具有促进心肌肥厚的作用，同时检测到ANP、BNP等心力衰竭指标明显升高。然而关于lncRNA-ROR在心力衰竭方面的研究鲜有报道。那么lncRNA-ROR在CHF患者血清中表达量是否升高呢？其表达量是否随心力衰竭程度加重而变化呢？其表达量与心衰指标相关性如何呢？本研究通过检测正常对照组和CHF患者组血清中lncRNA-ROR的表达，进一步分析CHF患者中lncRNA-ROR的表达水平及与心功能指标的关系。
2.资料与方法
研究对象：选取2017年1月至2018年5月在郑州大学第二附属医院心血管内科接受诊治的109例CHF患者，依据《中国心力衰竭诊断和治疗指南2014》作为诊断标准，作为慢性心力衰竭组(59.76±6.67岁)，其中男性64例、女性45例，并且按照NYHA心功能分级，分为Ⅰ级-Ⅳ级，其中Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级分别为28例、30例、27例和24例。选取同期健康体检者25例为对照组(61.05±4.35岁)，其中男性13例、女性12例。资料的收集及处理：一般信息的采集：由护理人员采集患者的一般信息并记录成表，包括患者的年龄、性别、烟酒史、血压等样本收集，采集两组受试者清晨空腹肘静脉血5ml，即刻用真空采血管采集静脉血静置于4℃冷藏30min后，室温下3000rpm离心15min，留取上层血清，置于-80℃冰箱备用。由本院检验科采用全自动生化分析仪测定患者的血糖、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯、丙氨酸氨基转移酶、肌酐、尿酸等生化指标。实时荧光定量聚合酶链式反应(Quantitative Real-time PCR)检测lncRNA-ROR在慢性心衰组和对照组中表达水平。彩色多普勒超声心动图检查患者左心室射血分数(LVEF)和左心室舒张末期内径(LVEDD)。取研究对象入院第二日清晨空腹血，采用南京市基蛋公司生产的免疫定量分析仪测量N末端B型利钠肽前体(NT-pro BNP)。统计学方法：采用SPSS21.0统计学进行数据分析。对计量资料进行正态性检验和方差齐性检验，符合正态分布时，采用((x)±s)表示，采用t检验进行两组间比较，采用单因素方差分析进行多组间比较。lncRNA-ROR与各临床基本资料之间的关系采用Chi-Square检验，lncRNA-ROR与心功能指标的相关性采用pearson分析。以P<0.05为差异具有统计学意义。
3.结果
(1)两组间年龄、性别、是否高血压、是否高血糖、是否吸烟，总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯、丙氨酸氨基转移酶、肌酐、尿酸，差异均无统计学意义(P＞0.05)。
(2)慢性心衰组患者血清中lncRNA-ROR表达水平、左心室射血分数、N末端B型利钠肽前体和左心室舒张末期内径与对照组比较，差异均有统计学意义(P＜0.05)。
(3)慢性心衰组中不同心功能分级亚组间进行单因素方差分析显示：随着心功能分级增高，左心室射血分数降低，左心室舒张末期内径、血清lncRNA-ROR表达水平和N末端B型利钠肽前体均升高，差异均有统计学意义(P＜0.05)。
(4)慢性心衰组患者血清lncRNA-ROR表达水平与其他因素进行Pearson相关分析显示，慢性心衰患者血清中lncRNA-ROR表达水平与左心室射血分数呈负相关(P＜0.05)，与心功能分级、N末端B型利钠肽前体和左心室舒张末期内径呈正相关(P＜0.05)。
4.结论
(1)血清lncRNA-ROR可能作为诊断CHF的新型生物学标志物。
(2)血清lncRNA-ROR的表达水平可能间接反映CHF患者病情的严重程度，这提示其可能作为评估CHF患者病情变化的理论依据。