鸭源大肠杆菌耐药性调查研究

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Y290107881
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大肠杆菌是鸭养殖中常见的致病菌,兽医临床上通常是使用多种抗菌药物联合治疗大肠杆菌感染,而不是每个养殖户都能合理使用这些抗菌药物,以至于大肠杆菌产生了多重耐药性,其耐药性的产生给鸭养殖和人类公共卫生带来了严重的威胁,引起了广泛的关注。目前关于抗生素在鸭养殖中的使用情况,以及大肠杆菌在鸭源中的耐药性及耐药基因的流行尚不清楚。所以,本研究对16个鸭养殖场展开抗生素使用情况调查,同时采集中国五个主要的鸭养殖场及周边环境中的样品,分离培养大肠杆菌,探索其药物敏感性以及确定其耐药基因,为减少大肠杆菌耐药性的产生以及临床治疗大肠杆菌的感染提供理论依据。2018~2019年,通过对16个鸭养殖场的抗生素使用情况的调查,发现抗生素的使用时间基本在鸭生长周期的1/3-1/2时期,使用时间为3-5天。使用的抗生素种类有16种,属于八种不同类别的抗生素,其中使用频率最高的是氟苯尼考(56.3%,9/16)和阿莫西林(31.3%,5/16)。通过采集广东省、福建省、浙江省、江苏省和山东省的1505份样品,用麦康凯分离培养基分离后,再进行16Sr RNA鉴定和MALDI-TOF-MS鉴定,总计获得449株大肠杆菌,分离率为29.8%。从地区上来看,在广东、福建、浙江、江苏和山东分别采集了192份、384份、300份、366份、263份样品,分别获得了83株、108株、130株、80株和48株大肠杆菌,分离率分别是43.2%、28.1%、43.3%、21.9%和18.3%。从样品来源上来看,鸭粪便、土壤和水采集了973份、276份和256份,分别获得了335株、52株和62株大肠杆菌,分离率依次为34.4%、18.8%和24.2%。采用琼脂二倍法检测分离得到的大肠杆菌对以下药物的最低抑菌浓度(MIC):头孢噻肟、阿米卡星、金霉素、环丙沙星、磷霉素、氨苄西林、替加环素、美罗培南,庆大霉素、磺胺甲恶唑/甲氧苄啶、氟苯尼考、黏菌素和阿莫西林/克拉维酸。结果表明,449株大肠杆菌对β-内酰胺类(头孢噻肟和氨苄西林)、四环素类(金霉素)、酰胺醇类(氟苯尼考)和磺胺类及磺胺增效剂都有较高的耐药率;对喹诺酮类(环丙沙星)、磷霉素、黏菌素、氨基糖苷类(阿米卡星,庆大霉素)和替加环素比较敏感,值得注意的是,对碳青霉烯类(美罗培南)非常敏感。采用PCR方法筛选大肠杆菌中的耐药基因的流行情况。结果发现:有90株携带blaCTX-M基因,检出率为20.0%(90/449);有34株携带aac(3)-II基因,检出率为7.6%(34/449);有27株携带aac(6)-II基因,检出率为6.0%(27/449);有27株携带arm A基因,检出率为6.0%(27/449);有42株携带qnr B基因,检出率为9.4%(42/449);有396株携带tet(A)基因,检出率为88.2%(396/449);有242株携带tet(B)基因,检出率为53.9%(242/449);有51株携带tet(C)基因,检出率为11.4%(51/449);有165株携带Sul1基因,检出率为36.7%(165/449);有256株携带Sul2基因,检出率为57.0%(256/449);有56株携带Sul3基因,检出率为12.5%(56/449);有18株携带dfr A基因,检出率为4.0%(18/449);有261株携带flo R基因,检出率为58.1%(261/449);有176株携带cml A基因,检出率为39.2%(176/449)。449株大肠杆菌中blaSHV、blaTEM、blaCMY、rmt B、qnr S、cfr、fos A3和mcr-1的阳性率比较低,另外未能检测到qnr A,tet(M)和tet(X)阳性的大肠杆菌。综上所述,氟苯尼考和阿莫西林是鸭养殖中常用的抗生素,鸭中的大肠杆菌存在多重耐药性,尤其对酰胺醇类、β-内酰胺类、磺胺类及磺胺增效剂和四环素类高度耐药。同时,四环素类、酰胺醇类和磺胺类及磺胺增效剂的耐药基因检出率最高。本研究通过对多重耐药的大肠杆菌在鸭及环境中的传播,为临床抗菌药物的使用对大肠杆菌耐药性的传播提供了参考依据,为减少耐药性的产生提供了理论依据。
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