【摘 要】
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植物内生真菌广泛寄生于植物各组织部位,在茎部的定殖和分离率较高,其次是种子、根、叶和花。大部分植物内生真菌与宿主植物具有互惠共生关系,其能够产生与宿主植物相同或相似的,具有抗菌、抗炎、抗肿瘤和抗虫等生物活性物质。本论文通过对松茸,美味牛肝菌和石斛内生真菌的次生代谢产物进行研究,以期可以发现结构新颖且生物活性良好的次生代谢产物,为新药物的研发提供新的方向和理论依据。第一章综述近年植物内生真菌次生代谢
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植物内生真菌广泛寄生于植物各组织部位,在茎部的定殖和分离率较高,其次是种子、根、叶和花。大部分植物内生真菌与宿主植物具有互惠共生关系,其能够产生与宿主植物相同或相似的,具有抗菌、抗炎、抗肿瘤和抗虫等生物活性物质。本论文通过对松茸,美味牛肝菌和石斛内生真菌的次生代谢产物进行研究,以期可以发现结构新颖且生物活性良好的次生代谢产物,为新药物的研发提供新的方向和理论依据。第一章综述近年植物内生真菌次生代谢产物及其生物活性的研究进展。第二章对目标菌株进行筛选。从采自云南中甸的松茸Tricholoma matsutake中分离得到40株菌、美味牛肝菌Boletus edulis中分离得到30株菌,对这70株菌进行化学多样性筛选,筛选出来源于松茸的哈茨木霉Trichoderma harzianum SM-6与来源于美味牛肝菌的茎点霉Phoma herbarum NM-46×1为备选菌株;对采自文山市铁皮石斛中的黑孢菌Nigrospora oryzae TPZ 10-1和紫皮石斛中的白耙齿菌Irpex lacteus ZPY 45-2分别进行单菌与混菌培养条件筛选,选择Irpex lacteus ZPY 45-2与Nigrospora oryzae TPZ 10-1共培养。第三章对哈茨木霉Trichoderma harzianum SM-6大蒜固体培养下的活性成分进行研究,分离得到5个已知化合物,鉴定为:cis-octadec-9-enoic acid（1）,pyrrole-2-carboxylic acid（2）,2-（4-hydroxyphenyl）ethanol（3）,thymidine（4）,dibu-tylphthalate（5）。对分离的化合物进行了抗菌和拒食活性研究,结果表明化合物2和4对烟曲霉Aspergillus fumigatus具有一定的抑菌活性,MICS值分别是4μg/m L和64μg/m L。化合物2、3对家蚕幼虫有一定的拒食活性,拒食率分别为68%,37%。喂食化合物2、3、4的家蚕幼虫体重下降,失重率分别是5%,4%,2%,空白对照家蚕幼虫的失重率为8%,喂食化合物幼蚕的失重率低于空白对照组。第四章对白耙齿菌Irpex lacteus ZPY 45-2和黑孢菌Nigrospora oryzae TPZ 10-1的混合培养物进行代谢物研究,得到3个化合物。其中包括1个新的化合物nigrolactin（1*）,2个已知化合物:stigmast-4-ene-3-one（2）,（+）-（3S,6R,7R）-tremulene-6,11,12-triol（3）。化合物1*,2对烟曲霉具有较好的抗菌活性,MICS值均为1μg/m L。化合物1*和2对家蚕幼虫具有微弱的拒食活性,拒食率分别为9%,4%。喂食化合物1*的家蚕幼虫失重率达到5%,空白对照失重率为8%,其失重率低于空白对照组。对课题组其他同学从白耙齿菌Irpex lacteus ZPY 45-2和黑孢菌Nigrospora oryzae TPZ 10-1混合培养物中分离得到8个已知的化合物（4-11）进行抗菌活性与家蚕幼虫拒食活性测试。其中化合物4、6、9-11对烟曲霉具有较好的抗菌活性,MICS值在1-32μg/m L之间。化合物5、10对家蚕幼虫具有较好的拒食活性,拒食率分别为77%,49%。喂食化合物5、7、10、11的家蚕幼虫失重率在4-9%之间。对不同培养条件下的TPZ 10-1与ZPY 45-2的粗提物进行抗菌活性与拒食活性研究。TPZ 10-1/ZPY 45-2（土豆:铁皮石斛=2:1）培养条件下得到的粗提物对烟曲霉Aspergillus fumigatus的抗菌活性较好,MICS达到2μg/m L。TPZ 10-1（PDB）培养条件下得到的粗提物对家蚕幼虫具有较好的拒食活性,拒食率为80%。ZPY 45-2（铁皮石斛）培养条件下得到的粗提物对家蚕幼虫的失重率为8%,ZPY 45-2（PDB）失重率达到10%,TPZ 10-1（土豆:铁皮石斛=2:1）失重率为14%。第五章从美味牛肝菌内生菌茎点霉Phoma herbarum NM-46×1的PDB培养液中分离鉴定3个化合物,包括1个新的化合物:phombolin（1*）以及2个已知的化合物:6-methylsalicylic acid（2）,3-hydroxy benzenemethanol（3）。化合物1*-3对烟曲霉具有较好抑菌活性,MICS分别为8μg/m L,1μg/m L,64μg/m L。化合物1*、3对家蚕幼虫具有较好的拒食活性,拒食率为88%,57%。
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