CAII和CAIII在过敏性鼻炎中的表达及意义

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目的:
  过敏性鼻炎(Allergic Rhinitis,AR)属于非感染性疾病(Noninfectious chronic disease,NCD)。AR的发病率逐年增加,现全球患病率约为10%-25%,并己成为全球性问题。迄今为止,其发病机制仍未研究透彻。前期研究提示碳酸酐酶(Carbonic anhydrase,CA)家族中的CAⅡ基因(Carbonic anhydraseⅡ,CAⅡ)和CAⅢ(Carbonic anhydraseⅢ,CAⅢ)基因在AR患者鼻腔黏膜与非AR患者鼻腔黏膜中,存在差异性表达。因此为进一步了解CA在AR发病中的作用,对CAⅡ和CAⅢ在基因和蛋白层面的表达进行研究,为AR的机制研究提供新思路和理论依据。
  方法:
  本研究术中用鼻科咬切钳咬取25例非AR患者的下鼻甲黏膜组织作为对照组,19例AR患者下鼻甲黏膜组织作为实验组。通过实时荧光定量PCR、免疫荧光染色及免疫组化染色分别检测CAⅡ和CAⅢ在下鼻甲黏膜组织中mRNA和蛋白水平的表达情况;文献报道hCAⅡ和hCAⅢ主要分布于黏膜下腺体中,上皮组织仅有少量分布。为了更确切了解其分布情况,本研究同时采用鼻刷刷取下鼻甲黏膜上皮细胞的方法,获取26例非AR患者鼻上皮组织为对照组,28例AR患者鼻上皮细胞组织为实验组,采用实时荧光定量PCR检测CAⅡ和CAⅢ在鼻刷上皮细胞组织mRNA水平的表达情况。所有实验结果数据应用SPSS20.0软件进行统计学分析,采用两独立样本的t检验,P<0.05说明有统计学差异。
  结果:
  1)实时荧光定量RT-PCR发现hCAⅡ基因在AR患者下鼻甲黏膜组织中的低表达,与对照组比较具有统计学差异(P=0.020,P<0.05),而在AR患者鼻刷上皮组织中表达无明显差异(P=0.310);hCAⅢ基因在AR患者下鼻甲黏膜组织和AR患者鼻刷上皮组织中的表达与正常组比较,均无明显差异(P=0.139,P=0.911)。
  2)免疫荧光染色发现hCAⅡ、hCAⅢ蛋白主要分布于黏膜下腺体的细胞胞浆中,二者在AR患者下鼻甲组织黏膜中低表达,与对照组比较具有统计学差异(P=0.000,P=0.047)。
  3)免疫组化染色显示hCAⅡ、hCAⅢ蛋白主要分布于黏膜下腺体中,在AR患者下鼻甲黏膜中弱表达,而对照组中表达较强。二者在AR患者下鼻甲黏膜组织中的表达低于对照组,有统计学意义(P=0.000,P=0.000)。
  结论:
  本研究对AR患者下鼻甲黏膜中可能有异常表达的hCAⅡ和hCAⅢ进行了基因和蛋白层面的验证。hCAⅡ和hCAⅢ主要分布在黏膜下腺体细胞胞浆中,在上皮组织中表达低。在蛋白水平和基因水平上,hCAⅡ在AR下鼻甲黏膜中均有低表达现象,表明因此hCAⅡ的低表达与AR的发生发展密切相关。hCAⅢ基因在AR下鼻甲黏膜中表达较非AR组无差异,但蛋白水平显示在AR下鼻甲黏膜中低表达,因此其在AR中的作用还需进一步研究。
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