民族药铁棒锤砂炒炮制品质量控制及有效成分体内代谢初步研究

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民族药铁棒锤为毛茛科乌头属植物铁棒锤A. pendulum Busch和伏毛铁棒锤A. flavum Hand-Mazz的块根。铁棒锤为藏、羌、回等民族的习用药,主要用于跌打损伤、风湿疼痛等疾病的治疗。别名雪上一枝蒿、三转半、黑草乌,性苦、热,微辛,有剧毒,由于其具有良好的祛风除湿、止痛、消肿散瘀的功效,常用于治疗跌打损伤、风湿痛、腰腿痛等疾病。铁棒锤为有毒药材,羌族特色炮制技术砂炒法具有”减毒存效”作用。但目前铁棒锤砂炒炮制品的质量标准研究缺乏,其“减毒存效”特征成分化学部位及成分体内代谢规律尚不明确。目的:本文以民族药铁棒锤砂炒炮制品为研究对象,在建立其质量标准的基础上运用血清药物化学和体外肠道菌群代谢的方法,以期明确铁棒锤砂炒炮制品药效成分及其体内代谢规律。方法:1、选择铁棒锤中试砂炒炮制品,采用薄层色谱法,高效液相色谱法和水分测定等方法,分别对其苯甲酰乌头原碱,水分、灰分、浸出物及重金属进行含量测定,建立铁棒锤砂炒炮制品的质量标准:同时,结合HPLC指纹图谱,研究炮制品的质量。2、以铁棒锤砂炒炮制品总生物碱为研究对象,采用HPLC-DAD/LC-MS的方法,对血清中移行成分进行分析。3、采用体外肠道菌群代谢方法,结合HPLC-DAD,研究铁棒锤砂炒炮制品特征成分苯甲酰乌头原碱的肠道菌群代谢规律。结果:1、铁棒锤砂炒炮制品中苯甲酰乌头原碱含量在0.053~0.173%之间,水分平均含量为2.80%,总灰分平均含量为2.89%,酸不溶性灰分平均含量为1.08%,70%乙醇浸出物平均含量为21.38%,铁棒锤砂炒炮制品中不得检出乌头碱。2、确定铁棒锤砂炒炮制品总生物碱中有2个成分以原形入血,其中一个为16-epi-pyroaconitine,苯甲酰乌头原碱未检测到入血。3、苯甲酰乌头原碱在体外肠道菌群的作用下,会发生代谢转化,代谢产物有待进一步研究。结论:1、制定了铁棒锤砂炒炮制品的质量标准,保证其临床用药的安全性和有效性。2、铁棒锤砂炒炮制后特征成分16-epi-pyroaconitine以原形方式入血。3、苯甲酰乌头原碱未以原形方式入血,结合肠道菌群代谢实验结果,证实其要在肠道菌群内代谢后入血。
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