microRNA-378-3p靶向CD226调控皮肤鳞状细胞癌增殖凋亡的相关研究

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目的:探讨皮肤鳞状细胞癌(cutaneous squamous cell carcinoma,CSCC)患者组织中microRNA-378-3p(miRNA-378-3p)的表达水平及后者对癌细胞的增殖、凋亡、侵袭与迁移的影响。方法:收集2017年02月到2019年02月在医院住院的83例CSCC患者的组织样本,利用荧光定量PCR检测癌组织和癌旁组织中miRNA-378-3p的表达差异,根据miRNA-378-3p转染情况将CSCC细胞系A-431分为miRNA-378-mimics组、miRNA-378-inhibitor组和空白对照组,采用CCK-8法检测三组细胞在0h、6h、12h、24h、48h时间点的增殖情况,采用Annex in V-FITC/PI双染法检测各组细胞的凋亡情况,采用Transwell实验检测三组细胞的迁移与侵袭能力。此外,通过Targetscan数据库预测miRNA-378-3p的靶基因,选取与肿瘤增殖、凋亡相关的靶基因CD226,利用Western Blotting检测各组细胞中CD226的表达量,并采用双荧光素酶报告实验检测miRNA-378-3p与CD226基因的相互作用关系。结果:CSCC患者癌组织中miRNA-378-3p的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.001);较空白对照组,miRNA-378-mimics组中CD226含量降低(P<0.001);双萤光素酶检验结果显示CD226为miRNA-378-3p的下游靶基因(P<0.001)。较miRNA-378-inhibitor组和对照组,miRNA-378-mimics组中的细胞增殖率明显升高而凋亡率降低(P<0.001,P=0.02),且细胞迁移、侵袭力显著增强(P<0.001,P<0.001)。结论:miRNA-378-3p在癌组织中表达上调,可以通过靶向CD226来调控癌细胞的增殖、凋亡、侵袭与迁移,提示miRNA-378-3p可以发挥类似促癌基因的作用,有可能成为CSCC诊断和新型生物治疗的靶点。
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