论文部分内容阅读
[目的]血友病关节炎(Hemophilia arthritis,Ha)发病机制不明,目前未建立相关基因敲除动物模型。因此,本实验通过构建出血性关节炎动物模型(The model of animal hemorrhagic arthritis)来探寻出血性关节炎(hemorrhagic arthritis)生理、病理机制,模拟血友病关节炎发生过程。进而从另一个角度模拟探讨血友病出血导致关节炎的机制。以关节滑膜病变程度以及相关影像学、病理结果作为动物模型建立是否成功的主要评判指标,同时监测实验动物生理变化。在临床疗效观察中对比个体化康复治疗对Ha患者受累关节功能以及日常生活能力(Activies of Daily Living,ADL)的改变,从而为康复治疗血友病关节炎奠定理论基础。[方法]选择雄性纯种比格犬3只,年龄均为1岁8个月,体重为12±0.4Kg。统计2018年9月—2019年3月期间,饲喂天然水蛭素后,实验犬凝血功能升高达到模拟血友病高出血风险水平,并且监测实验期间不同的凝血功能状态下凝血功能活化部分凝血活酶时间(Activated Partial Thromboplastin Time,APTT)、凝血酶原时间(Prothrombin Time,PT)、血管内皮细胞生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)的数值。在实验组犬(2 只)双侧膝关节腔自体血注射3天/次,注射后PRICE原则保护,以及72小时后适当户外奔跑康复训练,总计注射20次后,动物模型建立完成。空气栓塞处死实验犬后取膝、踝关节滑膜、软骨观察关节损伤程度以及相关苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-Eosin staining,HE染色)及铁染色检查病理改变。临床实验收取10例HA患者,依据FITT(训练频率Frequency、训练强度Intensity、训练类型Type、训练时间Time)训练原则下,每周5天,一天一次,中等运动强度下给予患者关节松动、肌力训练、姿势纠正及平衡训练、ADL功能训练等康复治疗方法,通过血友病关节功能独立性评分(Functional Independence Score in Haemophilia,FISH)和血友病关节健康评估表(Haemophilia Joint Health Score,HJHS)评分前后对比治疗效果。[结果]研究结果表明我们发现凝血功能水平对实验犬的VEGF表达有明显的影响作用(P<0.05),当APTT达到犬血友病凝血功能表现时,VEGF明显高表达;正常凝血状态时,VEGF恢复正常,且在关节腔内大量反复自体血注入并不引起其升高。实验犬关节解剖中受累关节滑膜仅有少量轻度增生及绒毛样改变,无明显血管重塑现象,HE染色可见滑膜、软骨轻度增生,轻度膝关节滑膜炎症反应。铁染色未见巨噬细胞炎症反应及含铁血黄素沉积。本次出血性关节炎动物模型建立成功,但未达到预期效果。临床康复疗效观察患者个体化康复训练后,病程中无明显出血症状,受累关节功能以及日常生活能力显著提高(P<0.05)。[结论](1)本次出血性关节炎动物模型建立成功,但未达到预期病变效果。(2)犬凝血功能水平对VEGF浓度有影响,当APTT明显升高至高出血风险状态时,VEGF表达呈现高表达状态;凝血功能正常时,VEGF也恢复正常。(3)康复手段干预下多次犬关节内自体血液注射仅引起关节轻度滑膜炎症变化与增生。(4)犬自体血关节注射不引起VEGF的明显改变,但不能直接推理血液对VEGF及关节炎性因子没有相关联的作用。(5)Ha患者个体化康复训练后受累关节功能与日常生活能力均有大幅度的改善,治疗期间患者无出血,是一项相对安全有效的Ha治疗方法。