【摘 要】
：
糖尿病是能量代谢紊乱疾病,引起骨丢失加重疾病负担,影响患者生活质量。当前关于糖尿病致骨丢失的治疗和普通骨质疏松症治疗类似,但存在药物副作用和长期治疗效果不明确等问题,确保药物安全性以改善患者生活品质并探索糖尿病致骨丢失机制很有必要。为了研究细胞经过高糖处理后的代谢、增殖和成骨分化情况,我们在体外建立细胞模型,分别使用含正常浓度葡萄糖（5.6m M）、高浓度葡萄糖（25m M）的α-MEM完全培养基
论文部分内容阅读
糖尿病是能量代谢紊乱疾病,引起骨丢失加重疾病负担,影响患者生活质量。当前关于糖尿病致骨丢失的治疗和普通骨质疏松症治疗类似,但存在药物副作用和长期治疗效果不明确等问题,确保药物安全性以改善患者生活品质并探索糖尿病致骨丢失机制很有必要。为了研究细胞经过高糖处理后的代谢、增殖和成骨分化情况,我们在体外建立细胞模型,分别使用含正常浓度葡萄糖（5.6m M）、高浓度葡萄糖（25m M）的α-MEM完全培养基和成骨培养基（OS medium）诱导细胞,并探索淫羊藿苷（Icariin,ICA）对高糖致骨丢失的治疗效果及相关分子机制。结果如下:○1 CCK-8和Ki67免疫荧光（Immunofluorecsence,IF）实验均证实高浓度葡萄糖促进MC3T3-E1增殖（P＜0.01）。○2茜素红染色显示高浓度葡萄糖显著抑制MC3T3-E1细胞矿化结节形成（P＜0.001）。ELISA、Western blot结果分别显示高浓度葡萄糖显著抑制ALP活性（P＜0.01）,并抑制ALP、OPN蛋白表达（P＜0.001）;通过IF和Western blot均发现Ac-α-tubulin和γ-tubulin表达显著降低（P＜0.05）,证实高浓度葡萄糖抑制原纤毛生长;Western blot结果显示高浓度葡萄糖显著抑制GYS1（P＜0.01）、IHH、SHH、Gli2、Glut4、PFKM和ACACA（P＜0.001）表达,促进PYGL（P＜0.05）和PDP1（P＜0.001）表达,而未对DHH、Gli1表达产生明显影响（P＞0.05）。○3通过在高糖培养基中添加ICA,茜素红染色结果显示三种成骨细胞（MC3T3-E1、BMSC、primary OB）矿化结节形成得到显著增加（P＜0.05）,ALP活性和成骨分化标志蛋白COLⅠ、OPN蛋白表达显著增加（P＜0.05）,证实ICA能有效缓解高浓度葡萄糖导致的成骨细胞分化和矿化抑制。○4在高糖培养基中添加ICA,Western blot结果显示,Ac-α-tubulin、γ-tubulin、SHH、Gli2蛋白表达被显著增加（P＜0.01）,而Ptch1、Sufu蛋白表达显著降低（P＜0.01）;IF证实ICA能促进高糖环境下原纤毛生长,并维持Gli2与Ac-α-tubulin共定位。○5Mito-Tracker Green荧光结果证实高糖显著抑制3种成骨细胞线粒体活性（P＜0.001）,Western blot结果也显示线粒体标志蛋白PGC-1α、NFR1、TFAM表达被抑制（P＜0.01）,加入ICA能有效增加线粒体活性并缓解蛋白表达抑制（P＜0.01）;DCFH-DA探针检测结果证实高糖导致成骨细胞中ROS大量生成,Mito Tempo和ICA均能发挥ROS清除剂的作用（P＜0.05）。以上结果证实,高浓度葡萄糖虽然一定程度上能促进MC3T3-E1细胞增殖,但却损害细胞的葡萄糖和糖原代谢,并通过破坏原纤毛稳态引起Hedgehog信号障碍导致成骨分化、矿化受损。ICA抑制高糖环境下线粒体ROS过量产生来保护原纤毛,完整原纤毛是Gli2转录后修饰及成熟位点,从而通过Shh/Gli2途径激活Hedgehog信号促进成骨分化和矿化,挽救高糖致骨丢失。提示控制血糖浓度和保护成骨细胞原纤毛可能是治疗糖尿病致骨丢失的一种新方案。
其他文献
自闭症谱系障碍（Autism Spectrum Disorder,ASD）是一种先天性中枢神经系统（Central nervous system,CNS）发育障碍性疾病。其核心症状为:社会交往交流障碍和重复刻板样行为。目前认为ASD的发生主要与兴奋-抑制（Excitatory/Inhibitory,E/I）失衡相关。γ-氨基丁酸（Gamma-aminobutyric acid,GABA）是大脑中主
自闭症谱系障碍（Autism spectrum disorder,ASD）是一组神经发育障碍性疾病,以社会交往、交流沟通障碍以及重复刻板行为等为典型临床表现。近年来,ASD的患病率显著增加,已成为广受关注的社会公共健康问题。ASD的确切病因仍不清楚,遗传、免疫、炎症、代谢以及环境等因素均与ASD的发病有关。目前的治疗方法,包括药物治疗和行为干预等均难以缓解ASD的核心症状,仅能针对焦虑、抑郁、癫痫
第一部分肝X受体激动剂对抑郁模型小鼠海马内神经炎症的影响目的:主要探讨肝X受体（liver X receptors,LXRs）激动剂GW3965对慢性不可预测应激（CUS）诱导的模型小鼠海马内神经炎症的作用,为抑郁症发病机制的阐述以及LXRs激动剂参与抗抑郁作用的药物开发提供理论依据。方法:选取150只4~6周龄的雄性C57BL/6J小鼠,在对小鼠进行适应性喂养和调整糖水偏好基线后,采用简单随机抽
目的利用Cre-Loxp系统构建在软骨中特异性敲除X-盒结合蛋白1（X-box binding protein 1,XBP1）基因的条件敲除小鼠,探究XBP1基因在小鼠软骨生长发育过程中的作用。方法将Ⅱ型胶原启动子启动Cre重组酶表达的Col2-Cre工具鼠与XBP1基因双侧标记Loxp位点的XBP1flox/flox小鼠进行杂交,利用Cre-Loxp系统,构建软骨中特异性敲除XBP1的条件性敲除
泛素分子是一种由76个氨基酸组成的小分子蛋白,在真核生物中高度保守。泛素分子在泛素激活酶（E1s）、泛素结合酶（E2s）、泛素连接酶（E3s）的级联酶促反应下共价连接到底物蛋白上,形成泛素化修饰。去泛素化酶（DUBs）可以移除被修饰底物蛋白上的泛素单体,使这一过程动态可逆。泛素化修饰广泛参与调控蛋白质质量控制和信号转导过程,其可逆性和高度动态的特征使得生物体众多的生物学进程得以有序进行,有效保持内
目的 帕金森病（Parkinson’s disease,PD）是世界第二大常见的神经退行性疾病,PD患者会经受因黑质致密部中多巴胺能神经元进行性丢失而导致一系列的运动障碍,主要包括静止性震颤、肌肉强直、运动迟缓以及姿态失衡。然而PD的诱发部位并不是黑质,并且存在着大量脑外病理特征。随着研究的深入,人们还观察到PD会出现以胃肠道功能障碍为主的非运动症状,包括腹胀、便秘和体重减轻等。因此近年来脑-肠轴
随着近年来我国经济快速发展,高中教育体制改革的深化,如何更有效的推进高中综合实践活动课程开展成为现代教育者研究的重点课题。高中综合实践活动课程作为高中教育教学体系的重要组成部分,在强化学生实践能力,健全学生认知模式方面发挥着重要作用。鉴于此,本文就高中综合实践活动开展的重要步骤展开详细分析,并提出具体的研究思路,供广大读者借鉴。
研究目的:胎盘是连接母体及半异源性胎儿的重要纽带,其在整个妊娠期间保持高度动态变化以平衡母-胎免疫耐受和满足胎儿不同发育阶段营养物质的转运需求。滋养细胞作为胎盘的主要构成细胞,其中由细胞滋养细胞（Cytotrophoblast,CTB）不断增殖和分化为合体滋养层细胞（Syncytiotrophoblast,STB）以及绒毛外滋养细胞（Extravillous trophoblast,EVT）是实现
脊髓损伤（SCI）的恢复与少突胶质前体细胞（OPCs）的分化密切相关,而少突胶质前体细胞分化受阻会导致不能形成新的髓鞘。为解除这个疑虑,药物治疗可能是应用于脊髓损伤患者临床治疗中最实际可行的方法之一。在本课题组之前的研究中发现,药物氯马斯汀的治疗保持了脊髓损伤模型中髓鞘的完整性、减少了轴突丢失且改善了损伤后的运动功能。氯马斯汀是从一系列抗毒蕈碱类药物中筛选得出的药物,可作为毒蕈碱乙酰胆碱受体（毒蕈
目的:糖尿病肾病（diabetic kidney disease,DKD）严重影响人类健康,目前研究认为circRNA可参与多种疾病的细胞增殖、分化和代谢过程,包括DKD。本研究目的是探究circUBXN7在DKD患者血浆、模型小鼠肾组织和高糖下人肾小管上皮细胞中的表达及功能调控作用,并阐明circUBXN7是通过何种机制参与DKD的发展,为DKD的临床诊断提供新的依据。方法:采用circRNA芯