实验目的研究大鼠急性脊髓损伤后自噬(autophagy)的激活情况及其表达的时程变化,探讨自噬这一细胞行为在急性脊髓损伤过程中的作用,以期为脊髓损伤的治疗提供新策略和新靶点。实验方法健康Wistar大鼠,雄性,体重250±20g,取20只随机分为正常对照组和损伤组用于透射电镜检测,另取50只随机分为正常对照组和损伤2h组、6h组、24h组、48h组用于Western blot检测。各大鼠均采用改良的Allen’s法制备大鼠急性脊髓损伤模型,透射电镜观察比较正常对照组和损伤组相应区域脊髓组织超微结构,检测自噬体(autophagosome)形成情况,免疫印迹法检测正常对照组和损伤2h、6h、24h、48h组相应区域脊髓组织自噬相关蛋白LC3(微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,MAP1-LC3))的表达情况。实验结果透射电镜下,大鼠正常对照组和损伤组超微结构图像显示:正常对照组大鼠脊髓组织神经元核膜完整、核型规则,胞质中线粒体形态分布及数目正常,未见自噬小体,溶酶体数目未见增多;损伤组损伤区神经元,细胞核形不规则,粗面内质网肿胀,溶酶体数目增多,神经元胞突与轴突均可见自噬小体,并可见线粒体肿胀;Western blot结果显示:正常对照组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值较低,SCI后2hLC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值较对照组即有明显增加(P＜0.05),SCI后6h LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值达到峰值(P＜0.01),持续至48h仍有较高表达。结论大鼠急性脊髓损伤后自噬被激活,其表达具有一定的时程变化,激活持续了至少48h,自噬可能在脊髓损伤过程中起了不可忽视的作用。