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黄秋葵(Abelmoschus esculentus(L.)Moench),原产非洲,其花中富含多糖、蛋白质、黄酮、脂肪酸、矿物质元素等,营养保健价值高,具有很大的开发潜力。国内外已有大量对黄秋葵嫩荚多糖的研究报道,但对黄秋葵花中同样富含的多糖类物质研究较少。本文通过比较不同提取方法所得多糖的理化性质以及抗氧化活性,探讨了提取方法对多糖性质的影响,优化了超声提取黄秋葵花多糖的工艺条件,并进一步分离纯化超声提取的多糖,对主要多糖组分的化学结构进行表征。1.以黄秋葵花作为原料,采用了热水、酸法、酶法、超声辅助提取的方法,分别得到四种粗多糖,其中酶法提取率最高。四种多糖的半乳糖醛酸含量在29.34%-52.63%,粗多糖中还检测出少量蛋白质、酚类物质。采用HPLC、红外光谱分析多糖的分子量、单糖组成和结构特征,结果表明得到的四种样品都具有多糖的典型红外光谱特征;四种多糖的单糖组成类型相同,主要由鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖组成,但单糖的摩尔比有所不同;酶法和热水提取的多糖样品具有较高的分子量且特性粘度较大,而超声提取显著降低了多糖的分子量和特性粘度,同时使多糖分子量的分布更加均一。扫描电镜观察的结果显示,多糖的微观表面形态主要呈现不规则的薄层状。通过DPPH自由基清除能力、氧自由基吸收能力等5种经典体外抗氧化实验,评价除去了色素等杂质后多糖的抗氧化活性,结果表明四种多糖具有不同程度的抗氧化活性且具有剂量依赖性。其中,超声辅助法提取的多糖抗氧化活性最强。2.采用单因素试验考察超声功率、提取温度、提取时间、料液比等因素对黄秋葵花多糖提取率的影响,再通过响应面分析法优化黄秋葵花多糖的提取工艺,最终优化的提取工艺:提取温度55℃,提取时间30 min,超声功率85.5 W,在此条件下多糖的提取率为12.62%。3.采用DEAE-Q Sepharose Fast Flow色谱柱对超声提取的多糖进行分离纯化。其中,0.5 mol/LNaCl溶液洗脱下来的组分含量较高,且为均一多糖,命名为UOFP-2。用HPLC、高碘酸氧化-Smith降解法,结合FT-IR、1D-NMR和2D-NMR图谱对UOFP-2的理化性质及化学结构进行研究,发现UOFP-2由鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖、阿拉伯糖和甘露糖组成,单糖摩尔比为32.11:20.67:44.41:1.51:1.30,多糖的主链由→2)-α-Rha-(1 →4)-α-GalA-(1 →交替的重复单元和同聚鼠李糖组成,以1→4、1→3连接的β-Gal为支链,连接在α-Rha的O-4位。多糖的构象采用SEC-MALLS-IR-VIS联用法研究和AFM观测,得到UOFP-2 的特性粘度为 1.78 dL/g,Mw 为 217 kDa,Mark-Houwink 方程中,特性常数α=0.31,表明UOFP-2在溶液中表现为球形构象,与AFM观测到的结果相符。4.多糖组分UOFP-2表现出了明显的羟基自由基清除活性,IC50为5.89 mg/mL,具有剂量依赖;UOFP-2的ORAC值为30.38μmol Trolox/g,CAA值为 342.98μumolQE/100g。