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近20年来,评价和筛选具有强抗氧化活性的天然资源已成为生物医药、食品科学等领域研究的新趋势。杨梅作为我国特产水果,因其营养价值极高,口感好,还含有多种对人体有生物活性的物质,如槲皮素、杨梅素等黄酮类化合物而深受海内外广大消费者的青睐。随着全球酒精消费量快速上升,各种与酒精相关的疾病增加,酒精性肝损伤成为全世界共同关注的健康问题,自由基是造成肝损伤的一个主要因素,筛选保肝药物具有十分重要的现实意义。本实验以杨梅为材料,对不同品种杨梅果实中黄酮类化合物的结构、含量和抗氧化活性进行了一系列研究,并通过建立亚急性小鼠肝损伤模型,探究了杨梅黄酮提取物对酒精诱导小鼠肝损伤的保护机制。主要研究结果如下:对“荸荠”、“水晶1”、“粉红”3种杨梅提取物进行了液质分析,发现主要黄酮类化合物有杨梅素、莰菲醇葡萄糖(或半乳糖)苷、杨梅素鼠李糖苷、杨梅素葡萄糖(或半乳糖)、槲皮素鼠李糖苷等;通过高效液相和比色法分析,“荸荠”种杨梅苷、杨梅苷与杨梅素含量之和及总黄酮含量略高。采用不同体系研究了不同品种杨梅黄酮粗提物对自由基的清除作用及抗脂质过氧化的效果,结果表明“荸荠”种清除自由基的能力最强,抗脂质过氧化效果最明显。通过化学发光法进一步研究了杨梅黄酮粗提物与黄酮对照品的抗氧化活性,结果表明,芦丁的抗氧化活性最佳,“荸荠”种杨梅黄酮粗提物的抗氧化活性高于其他品种,杨梅果实的抗氧化活性能力与其黄酮的含量成剂量效应关系。采用酒精灌胃法制造亚急性小鼠肝损伤模型,并选用抗氧化活性最好的“荸荠”种杨梅黄酮提取物作为干预物,以葵花牌护肝片作为阳性对照药物,采用试剂盒以及组织病理观察等手段,探讨了亚急性酒精暴露及杨梅黄酮干预对小鼠肝脏组织切片、小鼠血清、肝匀浆组织、肝线粒体、肝微粒体抗氧化系统及血清脂质水平的影响:1)肝脏组织切片观察结果:正常组肝小叶结构清晰,细胞索排列整齐,肝细胞无明显病变;模型组肝正常结构消失,小叶界限不清,细胞索紊乱,大部分肝细胞呈中到重度水肿;杨梅黄酮治疗组小叶结构清晰,细胞索排列整齐,肝细胞仅有轻度浊肿或胞浆疏松。2)对小鼠血清的影响:与模型组比较,经酒精诱导的亚急性肝损伤小鼠预先摄入杨梅黄酮中(100mg/kg.bw/d)、高剂量(200mg/kg.bw/d)后,其血清的AKP(P<0.01)、AST (P<0.01)、ALT (P<0.05)活性显著降低,杨梅黄酮低剂量组(50mg/kg.bw/d)小鼠血清的AKP活性显著降低(P<0.01),但AST、ALT活性无统计学意义;低、中、高剂量组明均降低了小鼠血清中TG、TC、L-DLC的含量,提高了H-DLC的含量,随着杨梅黄酮低、中、高剂量浓度的逐渐加大,其保肝作用呈增强趋势。3)对小鼠肝匀浆各指标的影响:经酒精诱导的亚急性肝损伤小鼠预先摄入杨梅黄酮中、高剂量后,其肝匀浆的ADH、GSH-Px、GST、GSH、SOD、CAT活性水平较模型组显著提高(P<0.01),低剂量组无统计学意义。高剂量组中MDA、NO、NOS的含量明显降低(P<0.01),而低剂量组无统计学意义。4)对小鼠线粒体各指标的影响:与正常组比较,模型组小鼠肝线粒体T-SOD、GST、CAT、GSH-Px水平均极为显著(P<0.01),预先摄入高剂量的杨梅黄酮及护肝片后,抗氧化酶T-SOD、GST、CAT、GSH-Px活性水平较酒精模型组得到明显改善,统计学意义极显著(P<0.01);且随着杨梅黄酮低、中、高剂量浓度的逐渐加大,其保肝作用呈增强趋势。5)对小鼠微粒体各指标的影响:与正常组比较,模型组小鼠肝脏微粒体GSH水平急剧下降(P<0.01),而MDA急速升高(P<0.01)。肝脏抗氧化酶GST、POD活性降低、GSH水平下降。较模型组而言,预先摄入高剂量的杨梅黄酮后MDA含量显著降低,为4.81±0.52nmol/mgprot (P<0.01), GSH、GST、POD活性显著升高,分别为5.53±0.42mg/gprot (P<0.01),63.18±7.48U/mgprot (P<0.01),2.90±0.22 U/mgprot (P<0.01);黄酮中剂量组MDA、GSH、GST的值有显著性统计学差异(P<0.01),POD有较显著性差异(P<0.05);低剂量组MDA、GSH、GST的也有较显著性差异(P<0.05),其POD活性无统计学意义。