【摘 要】
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目的:检测甘油二酯激酶（diacylglycerol kinase,DGK）ζ、细胞骨架在大鼠胚胎神经管形成过程中的表达变化,探讨其与神经管发育的关系。方法:取E9.5～E12大鼠胚胎各6只,横断面连续切片,免疫组织化学方法检测胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）、巢蛋白（Nestin）和DGKζ在神经管的表达,并对GFAP和Nestin阳性
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目的:检测甘油二酯激酶（diacylglycerol kinase,DGK）ζ、细胞骨架在大鼠胚胎神经管形成过程中的表达变化,探讨其与神经管发育的关系。方法:取E9.5～E12大鼠胚胎各6只,横断面连续切片,免疫组织化学方法检测胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）、巢蛋白（Nestin）和DGKζ在神经管的表达,并对GFAP和Nestin阳性细胞率进行统计学分析;免疫荧光双标法检测DGKζ、纤维状肌动蛋白（fibros actin,F-actin）和磷酸化蛋白激酶Cδ（phosphorylated protein kinase C,p-PKCδ）在神经上皮细胞的表达。结果:1.免疫组化染色和细胞计数显示,神经干细胞（neural stem cell,NSCs）标记物GFAP早于Nestin,于E9.75开始表达,但随着胎龄增加表达逐渐减弱,且阳性细胞率逐渐降低;而Nestin则在E10.25才在神经上皮表达,E11之后随着神经沟闭合及脑泡开始发育,Nestin表达从头端到尾端逐渐增强,阳性细胞率显著升高。2.免疫组化染色显示,DGKζ在E9.75～E12大鼠神经上皮均有表达,但表达强度和细胞内定位随胎龄和部位发生变化。在E9.75和E10,DGKζ表达在大部分神经上皮细胞的胞浆和细胞核,但在处于分裂期的M带细胞只表达在细胞核;E10.25～E12,DGKζ在神经管塑形活跃的背外侧绞合点等区域阳性表达较强,表达于胞浆和胞核,且多位于核内。3.免疫荧光双标染色显示,F-actin主要表达在神经上皮的胞核,DGKζ和p-PKCδ分布在F-actin阳性的微丝上。结论:随着大鼠神经管的发育,Nestin+的NSCs比例逐渐增多,DGKζ动态表达于NSCs的胞核和胞浆,核内DGKζ可能通过DAG/PKCδ途径来调节F-actin的功能。
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