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酶在生物催化剂领域有着广泛的应用,对于人类的科学研究和工业生产有着重要的意义,然而许多酶在生产过程中容易发生错误折叠而失去活性,这大大降低了酶的生产效率和工业应用。本文提出了一种利用复合胶束模拟分子伴侣来辅助蛋白酶复性的方法。我们制备了三种由不同比例的嵌段共聚物聚乳酸-b-聚(N-异丙基丙烯酰胺)(PLA-b-PNIPAM)与聚乳酸-b-聚乙二醇(PLA-b-PEG)组成的温敏性的复合胶束(mixed-shell polymeric micelles,MSPMs),通过动态光散射考察了复合胶束在37℃以及在变性剂存在下的稳定性。以碳酸酐酶(CAB)和脂肪酶(Lipase)作为模型蛋白,研究了MSPM辅助蛋白质折叠的能力。结果表明,在高浓度变性剂存在下,PNIPAM仍具有温敏性,并且质量比为1∶1的PLA-b-PNIPAM和PLA-b-PEG制备的MSPM具有非常好的稳定性。不同比例的MSPM对于CAB和Lipase都具有辅助复性效果,远远高于没有MSPM时的自发复性。其中,质量比为1∶1的MSPM使CAB的复性率高达92.1%,Lipase的复性率也达到50%。 随着基因工程和蛋白质工程的发展,人们利用大肠杆菌的特性,可以大量生产目的蛋白,但是由于大肠杆菌细胞自身的机制,所得到的产物通常为包涵体,即蛋白质的聚集体,没有生物活性。基于前面的研究,我们期望通过该复合胶束,或者在此复合胶束的基础上做一些修饰,以辅助包涵体蛋白的复性。人亲环素33(hCyP33)是一种在人T细胞核内被发现的亲环素类蛋白,在新生肽链的折叠和生物大分子的组装过程中起关键作用。在此部分中我们在大肠杆菌中成功达了hCyP33蛋白,提取了hCyP33蛋白的包涵体,经过洗脱和溶解后,通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)证实,我们已得到较为纯净的目的蛋白,为下步应用复合胶束辅助该蛋白复性的研究工作奠定了基础。