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硒是一种人体必需的微量元素,是GSH-Px的活性成分,能够排除体内脂质过氧化物,提高人体免疫力延缓衰老。与无机硒相比,有机硒毒性小而且能够很好的被吸收。硒多糖的化学结构与普通多糖不同,硒多糖具有硒氧键。硒多糖具有很多生物活性,能够拮抗重金属和抗氧化的能力。硒的微生物转化是硒多糖的研究热点。由于海洋假单胞菌PT-8能够产大量的胞外多糖,因此我们利用该菌生产发酵胞外硒多糖。本论文的海洋假单胞菌PT-8能够通过生物转化产生胞外富硒多糖(Se-EPS),经深层发酵后,将无机硒转化为有机硒。发酵液通过蒸发浓缩、离心、乙醇沉淀后经去蛋白、脱色、DEAE-cellulose柱层析、Sephadex G-100和高效液相色谱柱层析等步骤获得的富硒多糖(Se-EPS)。并进一步研究了硒多糖的性质及构效关系。结论如下:富硒多糖的制备 根据海洋假单胞菌PT-8的生长量和多糖产量,确定了 Na2Se03最适加入时间为6h,最佳添加浓度为20μg/mL。富硒多糖的产量为6.98g/L。富硒多糖的结构分析 提取的多糖经过浓缩、透析、冻干得到富硒多糖粉末。然后在经过DEAE-52和Sephadex G-100纯化得到纯品富硒多糖,命名为Se-SPS-2。该富硒多糖在260nm和280nm处没有吸收峰,证明该富硒多糖不含蛋白和核酸。通过红外光谱、高效液相色谱和气相色谱对富硒多糖进行结构的分析。红外光谱显示硒与多糖的结合是以Se=0或者Se-O-C的形式。富硒多糖气相结果显示富硒多糖含有鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,分子量为3.54kDa;而未富硒的胞外多糖含有鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,分子量为19.18kDa。富硒多糖抗氧化性的研究 以未富硒的多糖(EPS)和Vc作为参照,测定硒多糖的体外抗氧化性。结果表明,富硒多糖和多糖都有较强的清除羟基自由基、超氧阴离子自由基的能力,并具有一定的清除DPPH自由基和还原能力。且硒多糖的抗氧化性远远高于未富硒的多糖。通过富硒多糖和未富硒的多糖对小鼠全血和肝脏的过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响。结果表明,Se-EPS(0.1 mg/g)小鼠血清和肝脏中的 SOD 值分别为 24.25± 1.1b U/mL 和 90.42±6.97 c U/mL,CAT 为 41.93±1.2 b,c和15.49±0.84d U/mL。高于对照组。血清和肝脏中的MDA为1.27±0.71b U/mL和 2.38±0.01a U/mL。