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目的探究微球蛋白1(microspherule protein 1,MCRS1)对胃癌细胞增殖和侵袭迁移的影响,为探讨MCRS1对胃癌的调控机制奠定实验基础。方法1、细胞培养与细胞株的筛选:体外培养胃癌细胞BGC-823、SGC-7901和胃黏膜上皮细胞GES-1,通过蛋白质印迹实验检测三株细胞中MCRS1的表达。选择MCRS1本体表达低的细胞进行后续过表达实验,选择MCRS1本体表达高的细胞进行后续下调实验。2、pcDNA3.1-myc-MCRS1重组质粒的构建和鉴定。3、基因转染:利用转染试剂Lipofectamine2000将pcDNA3.1-myc-MCRS1重组质粒和MCRS1 siRNA分别转入相应胃癌细胞中。过表达实验分为空白组、pcDNA3.1空载体转染组和pcDNA3.1-myc-MCRS1转染组(过表达组);siRNA干扰实验分为空白组、control siRNA转染组和MCRS1 siRNA转染组(下调组)。4、MTT实验检测过表达和下调MCRS1对胃癌细胞增殖能力的影响。5、克隆形成实验检测过表达和下调MCRS1对胃癌细胞增殖能力的影响。6、划痕实验检测过表达和下调MCRS1对胃癌细胞迁移能力的影响。7、Transwell实验检测过表达和下调MCRS1对胃癌细胞侵袭和迁移能力的影响。8、蛋白质印迹法检测过表达和下调MCRS1对上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、ZO-1、Snail1、Snail2和Twist)表达的影响。结果1、与正常胃黏膜上皮GES-1细胞相比,在胃癌细胞BGC-823中MCRS1表达较低(P<0.01),而在胃癌细胞SGC-7901中表达高(P<0.01)。2、PCR鉴定和测序分析表明MCRS1重组质粒构建成功。3、与空白组和空载体转染组相比,过表达组MCRS1蛋白表达显著增加(P<0.01);与空白组和control组相比,下调组MCRS1蛋白表达显著降低(P<0.01),验证基因转染成功。4、MTT实验结果证实上调MCRS1,抑制胃癌细胞BGC-823增殖(P<0.01);而下调MCRS1,促进胃癌细胞SGC-7901增殖(P<0.01)。5、克隆形成实验结果证实上调MCRS1,胃癌细胞BGC-823克隆数目减少(P<0.01);而下调MCRS1,胃癌细胞SGC-7901克隆数目增多(P<0.01)。6、划痕实验结果证实上调MCRS1,胃癌细胞BGC-823划痕相对距离增大,细胞迁移率降低(P<0.01);而下调MCRS1,胃癌细胞SGC-7901划痕相对距离减小,细胞迁移率升高(P<0.01)。7、Transwell实验结果证实上调MCRS1,胃癌细胞BGC-823的侵袭、迁移数目减少(P<0.01);而下调MCRS1,胃癌细胞SGC-7901的侵袭、迁移数目增多(P<0.01)。8、蛋白质印迹实验结果证实与空白组和空载体转染组相比,过表达组E-cadherin和ZO-1蛋白表达增加,N-cadherin、Snail1、Snail2和Twist蛋白表达减少(P<0.01);与空白组和control组相比,下调组E-cadherin和ZO-1蛋白表达减少,N-cadherin、Snail1、Snail2和Twist蛋白表达增加(P<0.01)。结论本研究结果证实过表达MCRS1可显著抑制胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移;下调MCRS1则促进胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移,其机制可能与MCRS1抑制胃癌细胞的上皮间充质转化相关。提示进一步探究MCRS1的功能可能对胃癌的早期诊断及术后转移具有重要意义。