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本研究应用质粒提取、细菌培养、PCR、酶连免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫测定(RIA)等技术,利用本实验室现有的以减毒沙门氏菌(CSO22)呈递的pGM-CSF/SS基因疫苗,口服免疫45只5周龄雌鼠,以空菌和PBS作为对照,研究生长抑素对生长和繁殖机能的影响及其生物学安全性。主要包括以下内容:1基因免疫对母鼠的促生长效果在初次免疫后2周、加强免疫后2周和4周,疫苗免疫组母鼠增重同空菌组和PBS对照组的增重相比差异显著(P<0.05);空菌组的增重高于PBS对照组,但差异不显著(P>0.05)。这些结果显示,SS疫苗免疫后对母鼠具有良好的促生长效果。2基因免疫对生长抑素抗体的影响基因疫苗免疫组在初次免疫后2周、加强免疫后2周和4周、母鼠分娩当天,血中抗体水平均显著高于空菌组和PBS对照组(P<0.05),特别是在加强免疫第4周,血中抗体水平与对照组比较差异极显著(P<0.001),但哺乳3周后,疫苗处理组与对照组差异不显著(P>0.05)。在SS基因免疫组,抗体水平一开始呈现逐步上升的趋势,到加强免疫后4周出现高峰,但分娩后抗体水平又逐渐下降,到哺乳3周后和对照组差异不显著(p>0.05)。pGM-CSF/SS基因疫苗免疫可引起较高的体液免疫反应,但抗体持续时间有一定限度。3基因免疫对母鼠繁殖机能的影响基因免疫后,对母鼠的发情周期、窝产仔数、窝重和初生重等繁殖指标进行检测,结果显示基因免疫组的发情周期比同空菌组和PBS对照组显著缩短(P<0.05),说明生长抑素疫苗免疫影响母鼠的发情。窝产仔数、窝重和初生重结果显示,疫苗组同空菌组和PBS对照组相比,差异不显著(P>0.05),但试验组仔鼠的初生重高于空菌组和PBS对照组。这些结果说明,疫苗免疫可缩短母鼠的发情周期,但对窝产仔数、窝重、初生重没有影响。测定血中雌激素和孕激素水平显示,在分娩当天,基因免疫组雌激素水平显著高于空菌组和PBS对照组(P<0.05),而在分娩后3周,各组雌激素都有所下降,但各组差异不显著(P>0.05);同样,但产后和哺乳3周时孕激素水平各组差异不显著。这些结果表明,SS疫苗免疫对雌激素分泌有促进作用,但对孕激素分泌无影响。4基因免疫对仔鼠生长发育的影响哺乳期仔鼠增重结果显示,在产后1周和2周,实验组的增重显著高于空菌组和PBS对照组(P<0.05),但在哺乳末期,其增重差异不显著(P>0.05)。哺乳期过后,基因免疫组和空菌组、PBS对照组相比,虽各周增重有所提高,但差异不显著(P>0.05);哺乳期后,同其它两组相比,基因免疫组的增重效果不显著(P>0.05)。仔鼠生后第3、6、9周,基因免疫组同空菌组和PBS对照组相比,抗体水平和生长激素水平有所提高,但差异不显著(P>0.05),结果同增重效果相吻合。这些结果说明,SS疫苗对母鼠的泌乳性能有一定改善,但哺乳期后,促生长效应不明显。5基因疫苗的生殖毒性和基因整合研究母鼠窝产仔数、窝重、仔鼠初重、雌雄比例、子代畸形率和死亡率、母鼠和仔鼠的脏器指数结果显示,基因免疫组同空菌组和对照组相比,差异不显著(P>0.05)。说明SS疫苗不会影响性成熟母鼠的正常生殖及子代的正常生长发育,对后代无致畸、致死的影响;应用PCR和琼脂糖凝胶电泳进行基因随机整合检测,基因免疫组母鼠和仔鼠各组织0.3μg基因组DNA整合质粒远远小于10个拷贝,远远低于基因组自发突变的概率(2×10-6),表明SS疫苗发生整合的可能性很低,构建的pGM-CSF/SS基因疫苗具有较高的生物安全性。