【摘 要】
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青贮饲料是反刍动物重要的粗饲料来源。优质安全的青贮饲料是保证家畜健康,提高畜产品品质的重要前提,是推动现代草牧业高效发展的有力保障。乳酸菌常被作为青贮添加剂,用于改善饲草青贮品质,提高饲草安全性。目前,乳酸菌添加剂常分离自植物源材料,如鲜草或青贮饲料。而动物源乳酸菌作为宿主消化道的重要组成部分,具有潜在的益生功能,通常直接作为饲料添加剂使用,但有关动物源乳酸菌对青贮饲料发酵品质和体外瘤胃发酵特性的
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青贮饲料是反刍动物重要的粗饲料来源。优质安全的青贮饲料是保证家畜健康,提高畜产品品质的重要前提,是推动现代草牧业高效发展的有力保障。乳酸菌常被作为青贮添加剂,用于改善饲草青贮品质,提高饲草安全性。目前,乳酸菌添加剂常分离自植物源材料,如鲜草或青贮饲料。而动物源乳酸菌作为宿主消化道的重要组成部分,具有潜在的益生功能,通常直接作为饲料添加剂使用,但有关动物源乳酸菌对青贮饲料发酵品质和体外瘤胃发酵特性的影响报道较少。因此,本研究从牛粪中广泛分离筛选优势乳酸菌,并将其添加于苜蓿青贮中,研究其对苜蓿青贮饲料品质及体外瘤胃发酵特性的影响,为动物源乳酸菌青贮添加剂的开发和利用提供理论基础。主要研究结果如下:1、动物源优势菌的分离、筛选与鉴定:从西门塔尔牛新鲜粪便中分离出53株菌株。基于生长能力和产酸速率,筛选出两株优势菌株FN-10和FW-14。经形态学观察及革兰氏染色,两株优势菌株均为革兰氏阳性杆菌,16S rRNA基因序列进行同源性比对表明FN-10和FW-14与植物乳杆菌的相似度分别高达100%和99.86%。2、以商品化植物源乳酸菌MTD-1为对照,对动物源乳酸菌FN-10和FW-14的生长能力、产酸速率、耐盐特性、碳源利用范围等生理生化特性进行测定,结果表明:动物源乳酸菌FN-10和FW-14的产酸速率较快、耐盐能力较强,而植物源乳酸菌MTD-1的生长能力和耐酸碱能力较强。FN-10和FW-14发酵液的p H均能在24小时下降至4以下且在Na Cl浓度为6.5%时能正常生长,但MTD-1在Na Cl浓度为6.5%时生长微弱。MTD-1能在p H范围为3.5～9.0内正常生长,而FN-10和FW-14只能在p H范围为4.0～8.5内正常生长。MTD-1、FN-10和FW-14都能在10℃下生长,但无法在45℃环境下生长。三株乳酸菌都能利用大部分的碳源发酵,如果糖、纤维二糖和水杨苷等。3、将动物源乳酸菌FN-10、FW-14和商品化乳酸菌MTD-1分别添加于苜蓿青贮中,设置对照组（CK）、MTD-1处理组、FN-10处理组和FW-14处理组,发酵90天后取样检测其对青贮营养品质和发酵品质的影响,结果表明:与CK处理组相比,三株乳酸菌均能显著增加乳酸含量,降低苜蓿青贮p H（P＜0.001）,减少粗蛋白的水解（P＜0.05）,改善青贮品质。与CK处理组和MTD-1处理组相比,动物源乳酸菌FN-10和FW-14能显著降低苜蓿青贮氨态氮含量（P＜0.001）。与CK处理组相比,FW-14处理组的非蛋白氮含量显著降低（P＜0.05）,FN-10处理组的中性洗涤纤维含量显著减少（P＜0.05）。因此,我们所筛选的动物源乳酸菌FN-10和FW-14均能促进苜蓿青贮的发酵,减少蛋白质损失,降低氨态氮的产生。4、为探究添加乳酸菌苜蓿青贮饲料对体外瘤胃发酵特性的影响,将发酵90天的未添加乳酸菌（CK）和分别添加乳酸菌MTD-1、FN-10和FW-14的苜蓿青贮饲料草粉置于瘤胃培养液中发酵48小时后测定其体外干物质消化率和挥发性脂肪酸含量等,结果表明:与CK处理组相比,FN-10处理组显著增加瘤胃培养液中的乙酸含量和总挥发性脂肪酸含量（P＜0.05）,MTD-1处理组显著增加瘤胃培养液中的的丙酸含量（P＜0.05）。此外,FW-14处理组48小时总产气量和体外干物质消化率最高,但与其他处理组之间无显著差异。将乳酸菌MTD-1和FN-10分别在体外瘤胃液中培养48小时,试验结果表明:FN-10和MTD-1均能在体外培养48小时内存活,但随着培养时间的延长,MTD-1和FN-10在瘤胃液中的活菌数逐渐下降,在培养中期第24小时瘤胃液中,FN-10的活菌数显著高于MTD-1（P＜0.05）。本研究从动物源优势乳酸菌的筛选及其生理生化特性的测定、动物源乳酸菌对苜蓿青贮发酵及体外瘤胃发酵的影响等三方面进行研究,为动物源乳酸菌制剂的开发和利用提供了基础理论数据,初步验证了动物源乳酸菌具有成为青贮添加剂的潜力。
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