目的:了解医院常见耐药菌分布状况，追踪由质粒介导的耐药菌在医院病区传播途径及其耐药谱，探讨细菌耐药性的传播机制及不同来源耐药菌的同源性，为预防和控制院内感染提供依据。方法:以兰州市两所医院的五个不同科室为采样点，分别采取病人床单、医护人员手、空气等标本，采用细菌常规鉴定方法进行致病菌的鉴定，从医院病房采集标本中筛选金黄色葡萄球菌及大肠杆菌，并借助药敏实验、质粒消除及转化实验、质粒图谱、限制性内切酶图谱等技术对两种菌进行耐药性及质粒同源性分析。结果:从两家省级医院五个科室共采集196份标本，分离病原菌380株，其中革兰氏阳性菌195株，占51.3％，革兰氏阴性菌185株，占48.7％，其中大肠杆菌25株，金葡菌15株，分离率分别为12.8％、7.7％。药敏结果显示，病房分离的25株大肠杆菌对所用的8种抗生素耐药，耐药率达76.0％，28.0％的菌株对一种抗生素耐药，32.0％的菌株对三种及三种以上抗生素耐药。临床分离菌株中，除1株对两种抗生素具有耐药性以外，其余菌株对三种及三种以上抗生素具有耐药性，其多重耐药率达91.7％。15株金葡菌中86.7％的菌株对除头孢西丁、头孢唑啉、头孢三嗪、万古霉素外的其它7种抗生素呈不同程度的耐药，耐药率达6.7％～60.0％，耐药率最高的为青霉素，最低的为庆大霉素，46.7％的菌株对三种及三种以上抗生素耐药，只有2株菌对一种抗生素耐药。在25株大肠杆菌中19株检出质粒，检出率为76.0％，所有菌株均携带24.8kb大小的质粒，提示该质粒是医院致病性大肠杆菌的流行质粒。12株临床分离大肠杆菌均携带质粒，共检出60个质粒，较病房分离株所携带的质粒大，大部分在10.0kb之上，83.3％的菌株含有五种及五种以上质粒。本次分离的15株金葡菌中12株含有质粒，其携带率为66.7％，检出质粒的菌株均带有约38kb大质粒，最多的1株菌带有11种质粒。对13株携带耐药质粒的大肠杆菌病房分离株进行质粒消除，除1株菌的耐药性始终未发生变化外，其余12株的耐药性有不同程度地改变，其中7株耐药性全部消失，5株仅有部分改变；12株临床分离株经质粒消除后，除2株菌的耐药性始终未变外，其余10株耐药谱发生显著变化。对11株含有耐药质粒的金葡菌进行质粒消除后发现，除2株菌的耐药性始终未发生变化外，其余9株其耐药谱有显著变化，其中3株菌耐药性全部消失，而其余6株仅有部分耐药性发生改变。对大小相同的大肠杆菌耐药质粒经EcoRI酶切后发现，同一科室大肠杆菌携带的耐药质粒含有相同DNA片段，不同科室菌株酶切图谱也相似，表明相同科室及不同科室均有同源性大肠杆菌存在。对同一医院相同科室的4株耐药金葡菌酶切后发现，3株菌均切到21.5kb片段，且其中2株同时切出7.7kb、15.3kb、21.5kb三个大小相同的DNA片段，表明相同医院同一科室有同源性金葡菌存在。结论:从金黄色葡萄球菌及大肠杆菌的科室分布特点可知，医院病房存在医护人员-医疗器械-病人-物表-陪护人员间的交叉感染，各病房耐药菌株通过耐药质粒的传递，从而造成同源性耐药菌在各科室的传播流行。因此，医院应及时采取相应措施，以有效控制，耐药菌在医院的播散，防止院内感染暴发流行。