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[ 背景 ]: 法医学是研究并解决司法实践中有关医学问题的一门学科。死亡时间(Postmortem interval,PMI)推断往往关乎着命案发生的时间、侦查范围的划定以及有关死亡的财产继承和保险理赔等,因此是国内外法医学者研究的热点,但至今仍未能得到很好地解决。本课题基于食品科学研究领域肉类新鲜程度及货架期的思路,将测定肉类新鲜程度的指标转化应用到法医学研究 PMI 方面,其中尤以电导率(Electrical conductivity,EC)的测定方法简便、快捷,有望应用于法医学现场 PMI 的快速推断。前期研究发现,大鼠骨骼肌 EC 与晚期 PMI 显著相关,是晚期 PMI 推断的良好指标,本课题针对不同组织 EC 和 PH 值变化与PMI 进行研究,试图找出 PMI 推断的有效指标并比较不同组织的适用范围,并进一步探讨EC值变化的内在机制。 [ 目的 ]: 1. 测定大鼠死后不同时间间隔脑、肺、肝、骨骼肌EC和pH值,研究不同组织EC、pH与PMI的关系,并探讨大鼠死后晚期不同组织的腐败情况。 2. 测定大鼠死后不同时间间隔肝、脾、肾的EC值,从而研究不同组织EC与早期PMI的关系。 3. 测定大鼠死后不同时间间隔骨骼肌 EC 值及其钾离子、钠离子、氯离子、钙离子、镁离子、无机磷、尿素、肌酐、尿素氮9种化学成分的含量,初步探究骨骼肌EC的内在变化机制。 [ 方法 ]: 1. 将 SD 大鼠采用颈椎错位的方法处死后,保存于 25℃左右的恒温条件下,于大鼠死后 7d内(间隔时间为 1d)不同时间间隔提取大鼠脑、肺、肝和骨骼肌四种组织,四种组织与去离子水按照一定比例制成质量浓度为 0.1g/ml 的匀浆浸渍液,测定各组织浸渍液EC值,比较大鼠死后四种组织EC随PMI的变化规律。2. SD大鼠处死后保存于25℃左右恒温环境中,于大鼠死后10d内(间隔时间为1d)不同时间间隔提取大鼠脑、肺、肝和骨骼肌四种组织,剪碎研磨并制成匀浆浸渍液,之后测定各组织浸渍液的 pH 值,观察大鼠死后不同组织 pH 值随晚期PMI的变化特点。 3. SD大鼠处死后保存于25℃左右的环境中,于死后1d内(间隔时间为3h)不同时间间隔提取大鼠肝、脾、肾三种组织并与去离子水混合制成匀浆浸渍液,测定不同组织浸渍液的EC值,分析大鼠死后不同组织EC与早期PMI的关系。 4. SD大鼠处死后保存于25℃左右的环境中,于死后7d内(间隔时间为1d)不同时间间隔提取大鼠骨骼肌组织,并与去离子水混合制成匀浆浸渍液,测定骨骼肌组织浸渍液 EC 值及常见的化学成分的含量,分析并探究骨骼肌浸渍液 EC 及其内在的生化指标随PMI的变化规律。 [ 结果 ]: 1. 大鼠死后7d内脑、肝、肺及骨骼肌浸渍液EC随PMI的增加逐渐增大,并且不同的组织EC随PMI的延长出现不同的变化规律,其三次回归方程依次为: Y(骨骼肌)=-17.55x3+186.67x2+24.39x+1292.45(R2=0.94); Y(脑组织)=-11.9x3+115.08x2+95.7x+1087.15(R2=0.95); Y(肝组织)=-6.79x3+53.82x2+383.25x+1101.61(R2=0.96); Y(肺组织)=-5.48x3+56.08x2+246.51x+1236.86(R2=0.93)。 2. 大鼠肝、肺 pH 值随PMI的延长而逐渐增大,其 pH 值与晚期 PMI的相关性显著,其三次回归方程分别为:Y(肝)=-0.002X3+0.031X2+0.047X+5.969 ( R2=0.95 );Y (肺)=0.002X3-0.046X2+0.360X+6.066 ( R2=0.96 )。而骨骼肌、脑组织pH值与PMI的相关性较肝、肺差。 3. 肝、脾的EC 值随早期PMI的延长而逐渐增大,两种器官的 EC与PMI用一次方程拟合较好,其一次回归方程依次为 Y(肝)=16.35x+1056.2(R2=0.97), Y(脾)=15.6x+1354.6(R2=0.95);与肝、脾相比,肾组织EC值在24h内变化不显著。 4. 大鼠死后7d内骨骼肌EC值随PMI的延长而逐渐增大,其浸渍液中尿酸、尿素氮以及无机磷的含量随 PMI 的延长而逐渐增大,镁离子的含量随 PMI 的延长而逐渐下降,而钾离子、钠离子、氯离子、钙离子和肌酐此 5 种生化指标与PMI的相关性较差,其变化无统计学差异。 [ 结论 ]: 1. 大鼠脑、肺、肝和骨骼肌 EC 值与 PMI 相关性均较好,肺、肝 pH 值与晚期PMI相关性均较好,提示利用尸体 EC值、pH值测定推断晚期PMI方面具有一定的实际意义。 2. 大鼠死后肝、脾 EC 值与早期 PMI 呈现出良好的线性关系,肝、脾 EC 值测定有望作为推断早期PMI的指标。 3. EC值和pH值两指标的测定方法简便、准确,符合现场法医学PMI的快速推断,但仍需要进一步收集人体数据测定并验证其准确性。 4. 大鼠死后骨骼肌浸渍液中尿酸、尿素氮、无机磷等化学成分含量变化与PMI、EC值的相关性均较好,初步探究了骨骼肌EC随PMI变化的分子基础。