论文部分内容阅读
第一部分 室间隔缺损相关基因分析[背景] 先天性心脏缺损(Congenital heart defects，CHDs)在新生儿中的发生率约占1％，是人类最常见的因为胚胎心脏在原始心管形成到四腔心脏完全发育成熟过程中，受遗传和/或外环境两方面因素影响而出现的发育异常，是造成新生儿非传染性死亡的主要原因。产前致死性先天性心脏畸形的发病率约为5％～10％。室间隔缺损(ventricular septal defect，VSD)约占CHDs的33％。虽然长期以来，人们已找到多个与心脏间隔缺损相关的基因，如NKX2.5，GATA4，BMP10等，但与多数先天性心脏病一样，VSD的发生发展与多基因异常有关，因此，人类VSD形成的精确的分子机制还尚未清楚。抑制性差减杂交(suppression subtractive hybridization，SSH)是以抑制性PCR为基础的分析基因表达变化的一种方法。它可有效的获得差减cDNA文库，提高低丰度差异表达cDNA的捡出率，并且可简化差减cDNA文库的分析，是目前鉴别差异表达基因的简便、有效的方法。迄今为止，在VSD和正常机体心肌组织中的基因表达差异尚未见研究报道，因此，本研究应用SSH技术，以获取与VSD相关的表达差异基因，为阐明先天性非家族遗传性VSD的发病机制提供新的线索和理论依据，为先天性心脏缺损疾病的基因诊断和治疗提供新的靶标。 [目的] 本研究通过收集VSD患者与正常人心室间隔心肌组织，应用