背景:同种异体肾移植是终末期肾病的最佳治疗方案。随着免疫抑制药物的发展和免疫抑制方案的不断优化,目前排斥反应在肾移植中已经得到了有效的控制。然而在肾移植的全过程中肾脏不可避免地遭受缺血再灌注损伤（IRI）的影响。IRI被认为是早期和晚期同种异体移植物功能障碍的最关键非特异性因素。IRI包括热缺血再灌注损伤（WIRI）和冷缺血再灌注损伤（CIRI）,通常所说的再灌注损伤指的是热缺血再灌注损伤,这方面已经有了大量研究,但是冷缺血再灌注对器官的损伤及其机制却少有研究。随着器官获取手术的不断完善和成熟,热缺血时间在器官获取过程中已经明显缩短,在脑死亡捐献者中的热缺血时间更是被严格控制,因此冷缺血对脏器损伤的影响显得尤为重要。早在1997年,Takadam等研究者就已经使用大鼠肾脏的冷缺血再灌注损伤模型进行科学研究,但目前对于CIRI的研究及损伤机理仍然不太明确。线粒体作为细胞的能量工厂,肾脏IRI与线粒体损伤密切相关。线粒体质量控制是维持线粒体功能稳定的重要机制;线粒体质量控制失衡,将导致细胞内环境紊乱、损伤甚至死亡。肾脏CIRI中是否出现线粒体自噬和线粒体损伤及其作用机制有待进一步研究。目的:1.构建小鼠肾脏冷缺血再灌注模型,探索模型中线粒体自噬和线粒体损伤情况,并对模型组和对照组的肾脏行高通量测序,然后通过生信分析筛选出差异基因;2.在细胞层面验证筛选出的差异基因,并初步探索其作用机制。方法:1.动物实验:实验动物分成模型组（切除右肾后,左侧肾脏冷缺血lh后再灌注不同时间）和实验对照组（切除右肾）。挑选肾脏损伤最严重和损伤轻微的模型组及对照组的肾脏行转录组测序。得到测序结果后,应用生物信息学分析方法筛选出模型组与对照组的差异基因。2.细胞实验:使用HK2细胞在低氧/复氧条件下对筛选出的差异基因进行验证。挑选复氧后细胞状态最差的时间点作为模型组与对照组比较,比较二者间差异基因表达情况与线粒体损伤、线粒体自噬的情况;下调差异基因后观察线粒体分裂、线粒体自噬和线粒体损伤情况。结果:1.成功构建CIRI模型,CIRI后血肌酐有所上升,于24h-48h达高峰;2.通过转录组测序和生信分析得到差异基因HILPDA;3.对HK2细胞进行低氧/复氧处理后,发现HILPDA表达上调,线粒体损伤加重;4.下调HK2细胞的HILPDA表达后行低氧/复氧处理,发现肾小管上皮细胞线粒体自噬活动增强,线粒体损伤减少。结论:1.HILPDA与肾脏冷缺血再灌注损伤成正相关;2.在肾脏冷缺血再灌注损伤中,HILPDA通过诱导线粒体过度分裂和自噬不足来导致线粒体损伤,从而损伤肾小管上皮细胞。