紫花苜蓿(Medicago sativa L.)被称为“牧草之王”,是一种可以与固氮根瘤共生固氮的豆科牧草,具有产量高,品质好,适应性好等优点。紫花苜蓿生长过程中会遇到各种逆境(如干旱、高温、低温、盐碱等)的胁迫,影响其正常发育及根瘤活性等。利用分子手段培育优良品种十分可行。近年来,紫花苜蓿基因的克隆、相关功能验证及遗传转化已经愈发成熟。糖基化是植物体内重要的代谢反应之一,植物体内的糖基化反应由糖基转移酶催化,影响着植物体的各种代谢活动。本研究从基因芯片中选取基因,利用RACE法克隆紫花苜蓿糖基转移酶73B2(MsUGT73B2)基因,比对其序列,进行生物信息学分析。以此为基础,利用qRT-PCR技术分析MsUGT73B2基因在干旱、ABA、盐等不同处理下在不同组织中的表达模式;构建植物过表达载体pCAMBIA1300-35S-MsUGT73B2-EGFP,利用农杆菌介导法将其导入拟南芥,成功获得MsUGT73B2转基因拟南芥。现将所有研究结果总结如下:1.采用RACE法,从紫花苜蓿中成功获得MsUGT73B2基因的cDNA全长。序列分析结果表明,该基因cDNA全长1512 bp,编码503个氨基酸残基,与蒺藜苜蓿GT99D基因相似性很高。2.qRT-PCR分析MsUGT73B2基因的表达模式,发现该基因在叶片中的表达量明显高于根中;在干旱和ABA处理时,基因表达量在0-2 h之间呈上升趋势,2 h之后呈下降趋势;对该基因进行盐处理时,发现该基因表量在0-4 h呈上升趋势,4小时达到最大值,之后呈下降趋势。3.成功构建过表达载体pCAMBIA1300-35S-MsUGT73B2-EGFP,并注射烟草进行亚细胞定位。利用蘸花法将MsUGT73B2基因转入到拟南芥中,经抗生素筛选及PCR检测,成功获得MsUGT73B2基因转基因拟南芥。