基于纳米金放大的生物传感器及DNA分子机器的研究

来源 :青岛科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qqQQ106942397
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
随着人类对基因诊断了解的不断深入,对DNA序列进行快速、准确、便捷的检测方法的研究越来越受到人们的重视。结果表明,所建立的检测方法灵敏度高、易制作、简便,在生物分析中将具有广阔的应用前景。本论文共分为六章:第一章,概述了DNA生物传感器的设计原理、分类,综述了DNA生物传感器的研究现状,重点介绍了DNA电化学传感器和DNA分子机器的研究现状。第二章,探讨了一个新颖的基于生物素亲和素及DNA修饰的Au纳米粒子的新型DNA传感器,用于放大辣根过氧化物酶(HRP)对于对邻氨基酚(OAP)-过氧化氢(H2O2)-辣根过氧化物酶(HRP)反应体系的催化。首先我们制备纳米金粒子,使纳米金与两种DNA结合,形成S1-Au-SA-bio,然后利用生物素和亲和素的特异性相互作用,将HRP连接到纳米金表面,接下来考察了Au纳米粒子放大的DNA生物传感器的制备条件,探讨了随着靶DNA的浓度的变化,反应体系在循环伏安法和微分脉冲伏安法的电信号的变化,从而得出线性变化关系,反应纳米金粒子的放大HRP催化对OAP-H2O2反应体系的效果。得到其线性范围为3.8×10-13 M到1.9×10-12 M,相关系数为0.9914。第三章,基于纳米金粒子放大作用研究的一种新型“夹心型”双酶修饰的DNA电化学生物传感器,同时进行两种靶DNA的测定。首先,在玻碳电极表面固定两种不同的捕获DNA,使之与互补配对的靶DNA杂交,同时制备修饰了靶DNA互补配对的DNA和连接双酶的DNA的纳米金粒子,再将两者通过DNA杂交连接为一体。由于纳米金上修饰大量的DNA连有双酶,因此通过本传感器测定的电化学信号明显增强,降低了检测限。通过检测两种反应产物的浓度与峰电流之间的关系,得到检测修饰HRP的DNA的线性范围:1.5×10-13 M 5.0×10-12 M,检测限为1.0×10-13 M;而修饰ALP的DNA的线性范围:4.5×10-11 M 1.0×10-9 M,检测限为1.0×10-12 M。第四章,在选定的最佳反应条件下制备DNA分子机器,以ssDNA为燃料的设计了一种可伸缩一维DNA分子机器,并用荧光、AFM、聚丙烯酰胺凝胶电泳进行表征。分子机器由修饰荧光集基团的短链DNA杂交而生成的环状DNA分子机器。利用DNA组装出纳米尺度下能够运动并实现能量转换的纳米机器,以互补DNA序列作燃料,通过自由能驱动的交换反应实现纳米机器的运转,用于检测各种环境分子,更可以检测特异性的DNA或RNA序列或一些特殊蛋白质,在多种基因疾病的早期诊断方面发挥着重要的作用。第五章,以pH的变化为条件,通过酸碱变化来实现对分子机器的驱动当反应体系为酸性时,分子机器为打开状态,Rhodamine Green、BHQ位于DNA的两端可以检测到荧光。当反应体系为碱性时分子机器折叠Rhodamine Green、BHQ位于DNA一端,荧光猝灭,检测到荧光信号低。荧光猝灭,向溶液中加入HCl,分子机器成打开状态,可以重新检测到高浓度的荧光信号。继续加入碱、酸可以不断循环。利用石墨烯吸附DNA,通过石墨烯的运载作用使分子机器进入细胞,完成对细胞凋亡的检测。第六章,结论部分,对全文内容进行了总结。
其他文献
二十余年的改革和发展,使囊中羞涩的中国人的钱袋子丰盈起来,有了钱的老百姓,迫切寻找新的致富门路。此时,一些贪婪的骗子利用了人们的这种心理,开始摇唇鼓舌,许以高额利率和
本文通过对荣华二采区10
期刊
机组割煤是综采面最大的产尘工序。最好的防尘技术措施应针对煤尘的形成处,即在截割煤岩时,减少粉尘的形成,其次是尽可能地在粉尘的形成点就近使粉尘凝聚。目前所采取的措施
以1年生对开蕨组培苗为试材,用以草炭、山皮土、园土、菌渣和珍珠岩为基质,按照不同比例配置的7种栽培基质[T1(CK1):草炭;T2(CK2):山皮土;T3V(园土)∶V(草炭)=2∶1;T4V(园土)
2014年,我作为高级维修技师去了布尼亚,那里没有网络、没有能听得懂的电台和电视,就只能过着日出而作、日落而息的原始生活。  当地人吃的食物大多是水煮或者油炸的薯类、肉类,米面也有,但大多都做得极为难吃。  布鲁诺找来了一只二手电饭煲给我,这才解决了饮食这个大难题。黑人朋友也不知道从哪儿听的“中国人什么都吃”,经常把抓到的蝙蝠等野味拿来给我吃,搞得我很尴尬。当然,如果有野兔之类相对正常的野味,我通
期刊
为了提高广大干部群众对党风廉政建设和反腐败斗争的认识,进一步推进党风廉政建设和反腐败斗争,我们走访了中央纪委副书记曹庆泽同志。记者:首先,请您谈谈20年来在邓小平理论指引下
随着社会的发展和全球化进程的加快,促进了国际经贸秩序的变革发展,其变革主要表现在权力结构变革和经贸规则变革两方面。在此背景下,我国应做出积极的战略选择,既有效应对国
本研究采用实验生态学的方法,研究了温度、盐度、光照和密度等生态因子对克氏双锯鱼(Amphiprion clarkii),仔鱼存活、生长和发育的影响,并从摄食率和饵料转化效率、呼吸和排
许多读书人惯用“学富五车、书通二酉”的古训,作为自己朝暮苦读的动力;但我觉得这只是通晓古今的一面,若能巧用书中的知识紧密结合自己的实践,德才兼备地造福于社会,才是读