可控制备的功能性微球在胰岛移植中的应用

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胰岛移植作为有望完全治愈1型糖尿病(Type 1 Diabetes Mellitus,T1DM)的治疗方法之一,已经受到了广泛的关注。面对胰岛移植中的免疫排斥问题,研究人员开发出通过包封胰岛建立物理屏障维持胰岛活性的方法。尽管一些T1DM患者通过该方法已经实现了短期的血糖控制并摆脱了对外源性胰岛素依赖,但是包封胰岛进行移植建立长期的血糖控制,依旧需要面对异物反应(Forign Body Reaction,FBR)和移植环境不适等问题。目前,微球由于高比表面积以及类似天然细胞外基质的性质,已经成为胰岛包载的主要载体。然而面对机体复杂的环境,如何制备兼具胰岛包封和应对机体环境的多功能的微球成为了挑战。近年来,基于微流控的液滴发生装置由于其可以很好地通过设计具有特定几何形状的微流体通道和控制诸如流速和流体组分来精确控制液滴形成过程,使其不仅能够解决胰岛的包封问题,还可以制备具有特殊功能的微球,为解决胰岛移植中的FBR和移植环境不适等问题提供新的思路。基于此,本硕士论文围绕微流控制备包封胰岛的新型微球展开研究,通过微流控设备以及微球前驱体的设计,包封胰岛建立物理屏障的同时,意图解决胰岛移植当前面临的问题,主要内容包括:简述了 1型糖尿病的病因、并发症、目前的治疗方式以及存在的问题和可能的解决方式;总结了 FBR的原理以及应对方式;阐述了微流控技术生成微球的方法以及在细胞应用中优势;最后提出本论文的选题依据以及研究内容。通过点胶针头搭建简易的微流控装置。使用微流控设备制备出内层具有高生物相容性、外层具有抗FBR的核壳结构双层微球。在体外,核壳结构微球具有抗蛋白黏附、抗细胞黏附以及降低巨噬细胞促炎因子分泌的功能;在体内,核壳结构微球能够在120天内显著降低微球表面细胞沉积。使用该微球包封胰岛植入糖尿病小鼠腹腔后,能在30天内维持小鼠正常血糖,并且微球内的胰岛活性良好。该核壳微球为胰岛移植载体提供了新的选择,同时该微球制备方法为微球表面修饰提供了新的思路。通过微流控装置制备了甲基丙烯酸明胶/纤维蛋白原双组分微球,该微球可以作为微凝胶的组分,通过针管进行注射。在凝血酶的催化下,微球表面的纤维蛋白原成胶形成纤维蛋白,在促进细胞黏附的同时使微球之间产生作用力而相互连接,进而使堆积的微球形成具有微米级孔隙的细胞支架。该支架在体外能够促进小鼠心脏内皮细胞的黏附、迁移与增殖。将双组分微球与内皮细胞一起植入小鼠皮下,再通过凝血酶催化形成支架,可以在14天内使小鼠皮下形成微血管。该体系将诱导管脉系统生成与胰岛移植结合在同一个时间维度,为解决皮下胰岛移植问题提供了新思路。本硕士论文中,针对腹腔胰岛移植的FBR问题与皮下胰岛移植乏氧的问题,我们使用微流控技术构建了两种胰岛包封的微球。通过一步法分别给予微球外层修饰与诱导微球形成凝胶支架的能力,使微球分别具有抗污性能与诱导管脉系统快速形成的能力来解决胰岛移植中的问题,为治疗T1DM提供了新的思路。
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