论文部分内容阅读
目的:本课题研究拟采用大鼠SAH模型,研究蛛网膜下腔出血后annexin A7的表达规律。后续实验拟采用ANXA7-siRNA干扰annexin A7的表达,探讨蛛网膜下腔出血后annexin A7的表达与神经兴奋性毒性的关系,为SAH患者的临床治疗和新型药物开发提供理论基础。方法:1.采用颈内动脉血管穿刺法建立SAH模型,应用干湿重检测脑水肿及渗出EB的含量评价血脑屏障通透性改变的情况,应用Garcia神经功能评分来评价神经功能缺损的情况,应用尼氏染色观察皮质神经元的形态和数量,并采用western blot和免疫荧光双标技术对annexin A7的表达进行定量和定性分析。2.应用立体定向侧脑室穿刺技术向大鼠脑组织注射lenti-ANXA7-siRNA,采用western blot技术检测annexin A7的表达情况,应用Glutamate Assay Kit检测脑脊液中谷氨酸的含量,并应用TUNEL染色观察神经细胞凋亡。结果:1.SAH组大鼠脑皮质annexin A7的表达明显高于空白对照组(p<0.05)。2.在SAH组颞叶皮质和海马中,annexin A7与神经元标记分子NSE存在共表达,而与星形胶质细胞标记分子GFAP未见共表达。3.ANXA7-siRNA组annexin A7表达低于SAH组和SAH+Vertor组(p<0.05)。4.ANXA7-siRNA组脑脊液中谷氨酸含量低于SAH组和SAH+Vertor组(p<0.05)。5.ANXA7-siRNA组脑水肿和EB含量低于SAH组和SAH+Vertor组(p<0.05),神经功能评分高于低于SAH组和SAH+Vertor组(p<0.05)。6.ANXA7-siRNA组海马区和皮质神经细胞凋亡率低于SAH组和SAH+Vertor组(p<0.05)。结论:1.蛛网膜下腔出血后脑皮质annexin A7的表达升高。2.蛛网膜下腔出血后颞叶皮质和海马组织中,annexin A7主要表达于神经元的胞浆中,细胞核内未见表达,星形胶质细胞也未见表达。3.Annexin A7上调与SAH后早期脑损伤中神经兴奋毒性有关。4.ANXA7-siRNA通过调控annexin A7的表达可减少谷氨酸的释放,减轻SAH后脑水肿和血脑屏障破坏,改善大鼠神经功能状态,减少神经细胞凋亡,有效缓解蛛网膜下腔出血后早期脑损伤。