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第一部分实验研究目的构建神经干细胞与内皮祖细胞共植体,通过慢病毒介导EGFP标记的共植体移植至血管性痴呆模型大鼠,模拟血管性痴呆脑内微环境,用Morris水迷宫检测模型鼠空间认知的变化,并运用激光共聚焦显微镜检测大鼠脑内标记蛋白,以探讨艾灸在改善空间认知及促进神经新生与血管再生共生中的作用,为艾灸治疗血管性痴呆空间认知障碍提供实验依据。方法1.分别培养与传代神经干细胞与内皮祖细胞,并构建经慢病毒介导EGFP转染的共植体,以满足细胞移植需要。2.采用分次进行右、左侧颈总动脉反复缺血再灌注并结扎法建立血管性痴呆大鼠模型。3.造模成功大鼠60只随机分为假手术组、VD模型组(VD组)、NSCs+EPCs空白组(NE空白组)、NSCs+EPCs+艾灸组(NE艾灸组)、NSCs+艾灸组(N艾灸组)等5组,选取百会、大椎、神庭悬灸治疗,Morris水迷宫分析各组治疗前后学习记忆与空间认知能力的变化。4.造模成功大鼠72只随机分为VD组、NE空白组、NE艾灸组、N艾灸组等4组,分别在艾灸干预1、2、3疗程后灌注取脑,激光共聚焦显微镜检测大鼠脑内标志蛋白表达,分析艾灸对神经新生与血管再生的干预作用。结果1.成功构建共植体,成功建立痴呆大鼠模型,各造模组之间潜伏期无明显差异(P>0.005)。2.3疗程后各组潜伏期比较,各治疗组较治疗前均明显缩短(P<0.05),NE艾灸组与VD组、NE空白组相比潜伏期较短(P<0.005),NE空白组、N艾灸组较VD组无明显差异(P>0.005)。3疗程后各组穿越平台次数比较,NE艾灸组、N艾灸组较治疗前穿越次数明显增多(P<0.05),治疗后NE空白组、NE艾灸组、N艾灸组穿越次数均明显高于VD组(P<0.005)。反转与复反转潜伏期比较,NE艾灸组在复反转实验中潜伏期明显短于NE空白组(P<0.017)。3.MAP蛋白表达比较,VD组无表达,NE空白组、NE艾灸组、N艾灸组均有阳性表达,NE艾灸组表达量高于NE空白组、N艾灸组(P<0.017)。NeuN蛋白表达比较,NE艾灸组表达量高于NE空白组、N艾灸组(P<0.017)。CD34阳性细胞计数比较,NE艾灸组阳性细胞数高于NE空白组、N艾灸组。3种蛋白均在第2疗程时表达较多。结论1.艾灸可以改善细胞移植后VD模型大鼠的空间认知,尤其是空间定位能力与空间翻转能力。2.艾灸可以通过良性干预神经新生与血管再生共生,促进细胞移植后VD模型大鼠NSCs分化为成熟神经元,促进EPCs分化为新生血管内皮细胞,是艾灸改善VD大鼠空间认知的可能机制。第二部分病案分析目的在已有实验结果的基础上,试通过典型案例初步了解化瘀通络灸对血管性痴呆患者空间认知障碍的神经心理学影响。方法选取安徽中医药大学第一附属医院针灸科门诊收入的符合纳入标准的血管性痴呆患者1名,经3疗程化瘀通络灸治疗,每周3次,4周为1疗程。分别在治疗前、第1疗程结束后、第3疗程结束后进行MMSE、MoCA、CDT、NFDS等量表评价及治疗后随访,观察化瘀通络灸对血管性痴呆空间认知障碍的作用。结果MMSE、MoCA分数均在第1疗程后上升,第3疗程时下降,NFDS分数逐渐下降,CDT分数逐渐上升。半年随访过程中患者总体精神面貌有明显改善。结论化瘀通络灸可改善VD患者空间认知方面的神经心理学评分。