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本文通过比较运输过程中二花脸猪和皮特兰猪的行为和血液生理生化指标的动态变化，以客观评价两品种猪的应激敏感性，并在此基础上，提出血浆皮质醇水平的品种差异与肾上腺皮质功能差异有关的假说。为验证这一假说，本研究从体內和体外两方面，对猪肾上腺皮质细胞皮质醇合成相关信号通路进行比较研究，在肾上腺皮质水平揭示了不同品种／基因型猪血浆皮质醇水平差异的分子机制。1运输过程中二花脸猪和皮特兰猪行为、血浆酶活和激素水平的动态变化本实验采用实时跟踪摄像和颈静脉血管瘘连续采样，观察二花脸猪(HalNN)和皮特兰猪(Halnn)在2h运输过程中的行为表现，并监测血浆肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）活性以及应激和代谢相关激素水平的动态变化。结果表明：运输前期（出发后15 min）二花脸猪主要表现探究行为和异常行为，中后期（出发后60-75 min和最后15 min）其蹲坐和躺卧行为逐渐增加；相反，皮特兰猪在运输前期探究行为较多，中后期主要表现为站立行为。运输过程中皮特兰猪血浆CK（P＜0.01）和LDH活性（P＜0.05）均显著高于二花脸猪。血浆CK活性呈现显著的时间效应和时间与品种的交互作用（P＜0.01）。血浆ACTH水平在运输过程中显著升高（P＜0.05），但品种间差异不显著。血浆皮质醇水平在运输开始后15 min即显著升高（P＜0.05），上车前及整个运输过程中二花脸猪皮质醇水平均显著高于皮特兰猪（P＜0.05）。代谢相关激素（胰岛素、T3和T4）在运输过程中总体表现下降，呈显著的时间效应（P＜0.01），但均未表现显著的品种差异。以上结果提示：不同品种猪在运输过程中表现不同的行为模式和血液生化指标的变化；二花脸猪和皮特兰猪血浆ACTH水平无显著差异，而皮质醇水平品种差异显著，提示两品种猪肾上腺皮质功能存在差异。2猪肾上腺皮质醇合成途径的品种差异及其分子机制为揭示二花脸猪和皮特兰猪肾上腺皮质功能的差异，本研究通过在mRNA和蛋白质水平检测两品种猪肾上腺黑皮素受体-2（MC2R）、cAMP反应元件结合蛋白（CREB）及其磷酸化CREB（pCREB）、类固醇生成急性调节蛋白（stAR），以及皮质醇合成途径中的关键酶等相关蛋白的表达，分析在体条件下猪肾上腺皮质信号转导和皮质醇生物合成途径在品种之间的差异。结果显示：作为皮质醇合成原料的血浆胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇在品种间均无显著差异；肾上腺MC2R mRNA及蛋白含量、CREB含量和3β-羟化类固醇脱氢酶（3β-HSD）mRNA表达水平均无品种间差异；二花脸猪肾上腺cAMP含量有高于皮特兰猪的趋势；二花脸猪肾上腺pCREB、StAR、P450scc蛋白含量和P45017α、P450c21和P45011β mRNA水平均显著高于皮特兰猪。提示二花脸猪血浆皮质醇水平高与其高丰度表达的肾上腺皮质cAMP／PKA／pCREB信号蛋白及其皮质醇合成限速因子StAR和关键酶有关。3 ACTH刺激体外培养的猪肾上腺皮质细胞合成皮质醇的信号转导机制—氟烷基因的影响为分析以上实验发现的肾上腺皮质功能的品种差异在多大程度上与氟烷基因型有关，本试验采用氟烷基因型分离的皮特兰×二花脸F2代仔猪，分离HalNN和Halnn仔猪的肾上腺皮质细胞，在体外培养条件下，检测对照组和ACTH处理组不同氟烷基因型肾上腺皮质细胞培养液中皮质醇水平，细胞中StAR、P450scc、MC2R、cAMP、CREB和pCREB的含量，以分析氟烷基因型对肾上腺皮质细胞皮质醇分泌的影响以及分子机制。结果显示：HalNN对照组皮质醇水平、细胞中StAR和P450scc含量均显著高于Halnn对照组，ACTH处理后两种基因型细胞以上三种指标均显著增加；对照组MC2R含量在基因型之间无显著差异，ACTH处理后均显著增加；HalNN对照组cAMP含量显著高于Halnn对照组，ACTH处理后均有增加的趋势；CREB含量在对照组间和ACTH处理后均无显著差异，HalNN对照组pCREB含量有高于Halnn对照组的趋势，且ACTH处理后两组均有一定程度的增加。提示不同基因型细胞分泌皮质醇水平的差异与cAMP／PKA／pCREB信号通路及其诱导的StAR、P450scc表达差异有关。二花脸猪和皮特兰猪肾上腺皮质功能的差异在很大程度上与氟烷基因型有关。相同氟烷基因型的猪肾上腺皮质功能是否存在品种差异尚待进一步研究。