【摘 要】
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乙烯响应因子(ethylene response factor, ERF)转录因子家族属于AP2/ERF转录因子超家族,含有保守的AP2/ERF结构域,根据其AP2/ERF结构域特点可进一步分为DREB和ERF两个亚家族
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乙烯响应因子(ethylene response factor, ERF)转录因子家族属于AP2/ERF转录因子超家族,含有保守的AP2/ERF结构域,根据其AP2/ERF结构域特点可进一步分为DREB和ERF两个亚家族。ERF转录因子在植物生长发育和应答非生物胁迫过程中发挥重要作用。本研究从拟南芥数据库中获得122个ERF家族基因成员的cDNA序列;利用生物信息学分析ERF转录因子的结构域、进化关系、理化性质等;用RT-qPCR鉴定122个ERF基因应答盐胁迫的特性;通过转基因鉴定AT1G43160和AT5G64750基因功能。具体结果如下:在盐胁迫条件下,122个拟南芥ERF转录因子基因中有36个基因上调表达,42个基因下调表达44个基因无应答。以15个应答盐胁迫基因为对象,分析ERF转录因子基因的表达模式表明,起初ERF基因的表达水平随胁迫时间的延长而明显的升高,在36h时间点达到最高,然后表达水平逐渐降低。克隆AT1G43160和AT5G64750基因cDNA,构建植物表达载体,培育AT1G43160和AT5G64750基因过表达和抑制表达转基因拟南芥AtERF#108、AtERF#108F、 AtERF#111、AtERF#111F。分析转基因拟南芥在150mM NaCl、4μM ABA、250 mM甘露醇条件下的生长发育情况和生理指标变化,结果显示基因过表达株系AtERF#108、 AtERF#111的抗逆能力明显提高,表现为在NaCl、ABA和甘露醇胁迫条件下的种子萌发率、植株鲜重、根长均比非转基因对照明显提高。DAB染色和NBT染色发现表达株系AtERF#108、AtERF#111在非生物胁迫胁迫条件下的过氧化氢和活性氧含量明显比抑制表达株系和野生型拟南芥低。
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