背景:目前慢病毒介导aggrecanase-1sh RNA及h IGF-1双向作用于类风湿患者骨髓间充质干细胞的研究还处在初级阶段。目的:观察在将aggrecanase-1sh RNA、h IGF-1基因同时转染到人骨髓间充质干细胞后,目的基因在细胞内的表达及细胞分化情况。方法:体外培养人骨髓间充质干细胞,并应用携带aggrecanase-1sh RNA、h IGF-1基因和绿色荧光蛋白的慢病毒载体转染第3代人骨髓间充质干细胞,同时以空载体转染人骨髓间充质干细胞作为阴性对照组。待病毒转染率到最高时分别提取各组细胞的蛋白检测从而得出目的基因表达量。并应用激光共聚焦显微镜观察转染成功后细胞的骨架及细胞形态。结果与结论:成功于体外培养出人骨髓间充质干细胞,而且以慢病毒为载体成功的将目的基因转染到细胞内。荧光显微镜下可观察到细胞发出绿色荧光,各组的平均转染效率可达到88%。Western blot检测结果及激光共聚焦显微镜下细胞形态显示,目的基因在人骨髓间充质干细胞内可高效持续的表达出相应蛋白,且细胞形态变化也可间接证明aggrecanase-1sh RNA、h IGF-1基因可共同促进人骨髓干细胞向软骨的定向分化。