目的:通过收集胎龄≤32周早产儿临床资料、动态检测血清及粪便反式-4-羟脯氨酸（Trans-4-Hydroxyproline,t-4-Hyp）水平、并随访早产儿纠正月龄3～6月龄时神经发育情况,分析早产儿脑损伤（Brain injury in preterm infants,BIPI）生后危险因素以及t-4-Hyp在胎龄≤32周早产儿BIPI发生、发展过程中的预测作用,为早期防治BIPI、改善预后提供理论依据。方法:将2020年12月01日至2021年12月01日,在生后24小时内至苏州大学附属儿童医院新生儿科重症监护室住院,且出生胎龄≤32周、住院时间≥28天的早产儿作为研究对象进行前瞻性研究。根据BIPI诊断标准,将发生脑损伤的研究对象作为BIPI组,未发生BIPI的研究对象中按1:1比例随机选取性别、胎龄、出生体重等一般资料与BIPI组相匹配的早产儿为非BIPI组,BIPI组中根据其严重程度,分为轻度和重度BIPI两亚组。（1）记录并比较早产儿出生及入院时情况、母孕期情况、早产儿原发基础疾病及合并症、住院期间治疗等情况、实验室及影像学检查等临床资料,入院24小时内对早产儿进行新生儿急性生理学评分围生期补充Ⅱ（score for neonatal acute physiology,perinatal extension,version Ⅱ,SNAPPE-Ⅱ）,并分析BIPI发生的生后危险因素;（2）通过酶联免疫吸附试验测定早产儿生后3天内、第7、14、28天的粪便及血清t-4-Hyp水平,比较两组间及不同程度BIPI亚组之间的差异及相关性;（3）早产儿于生后3天内、第7天完善头颅B超检查,之后每周复查一次,纠正胎龄34～40周时完善头颅磁共振成像检查,并于纠正胎龄40周时行新生儿行为神经测定（Neonatal behavioral neurological assessment,NBNA）;（4）通过ROC曲线评估早产儿生后危险因素、粪便及血清t-4-Hyp水平对胎龄≤32周早产儿BIPI的早期预测效能,并用Logistic回归分析联合ROC曲线构建BIPI发生的早期预测模型;（5）随访早产儿纠正月龄3～6月龄时行0～1岁小儿神经运动20项检查（简称:神经20项）及0～6岁儿童发育行为评估量表（简称:儿心量表-Ⅱ）检查评估神经系统发育状况。结果:一、临床资料分析:（1）两组早产儿一般情况比较:65例早产儿中,BIPI组29例,其中男18例,女11例,平均胎龄（29.92±1.80）周、平均出生体重（1332.24±252.18）g;非BIPI组29例,其中男15例,女14例,平均胎龄（30.30±1.57）周、平均出生体重（1312.41±261.48）g。两组性别、头围、胎龄、娩出方式、出生体重、是否为试管婴儿、是否为双胎或多胎无显著差异（P＞0.05）;（2）两组母孕期一般情况比较:两组早产儿母亲年龄＜20岁或＞35岁、胎盘早剥、胎膜早破≥18h、妊娠期合并症（糖尿病、甲状腺功能减退、贫血、高血压）、产前用药（糖皮质激素、硫酸镁、抗生素）、宫颈机能不全比例均无显著差异（P＞0.05）;（3）两组入院24小时内SNAPPE-Ⅱ评分、原发基础疾病及合并症比较:BIPI组SNAPPE-Ⅱ评分明显高于非BIPI组（P＜0.05）,新生儿呼吸窘迫综合征（Neonatal respiratory distress syndrome,NRDS）、Ⅱ型呼吸衰竭、频发呼吸暂停、感染性肺炎、血红蛋白（Hemoglobin,Hb）浓度＜90g/L、肠外营养相关性胆汁淤积症（Parenteral nutrition associated cholestasis,PNAC）、酸中毒、宫外生长发育迟缓（Extrauterine growthretardation,EUGR）、Apgar评分≤7（1 or 5min）发生率均显著高于非BIPI组（P＜0.05）,而两组在坏死性小肠结肠炎（Necrotizingenterocolitis,NEC）、支气管肺发育不良（Bronchopulmonary dysplasia,BPD）、呼吸衰竭、Ⅰ型呼吸衰竭、呼吸机相关肺炎（Ventilator associated pneumonia,VAP）、早产儿视网膜病（Retinopathy of prematurity,ROP）、败血症、动脉导管未闭（Patent ductus arteriosus,PDA）、房间隔缺损（Atrial septal defect,ASD）、室间隔缺损（Ventricularseptaldefect,VSD）、低血糖、肺动脉高压、低钙血症的发生率比较均无显著差异（P＞0.05）;（4）两组住院期间治疗等情况比较:BIPI组输血次数显著多于非BIPI组（P＜0.05）,而两组抗生素使用等级、抗生素使用天数、是否使用有创/无创机械通气、有创/无创机械通气时间、总吸氧天数、吸氧浓度≥30%天数、肠外营养天数、有无咖啡因使用、住院天数比较均无显著差异（P＞0.05）;（5）两组入院第1天实验室检查比较:BIPI组PaCO2＜35mmHg和（或）＞55mmHg发生率显著高于非BIPI组（P＜0.05）,而血钠、血钾、血钙、乳酸、实际碳酸氢根、肌酐、前白蛋白、球蛋白、白蛋白水平两组间无显著差异（P＞0.05）;（6）入院28天内两组不同时间点胆固醇水平比较:①组间比较:BIPI组早产儿生后第1天胆固醇水平显著低于非BIPI组（P＜0.05）,而两组生后第7、14、21、28天胆固醇水平比较均无显著差异（P＞0.05）;②组内比较:BIPI组早产儿生后第1天胆固醇水平显著低于第7、14天（P＜0.05）,而生后第7、14、21、28天胆固醇水平组内比较均无显著差异（P＞0.05）;非BIPI组早产儿生后第1、7、14、21、28天胆固醇水平组内比较均无显著差异（P＞0.05）。二、胎龄≤32周早产儿BIPI发生的生后独立危险因素分析:将上述临床资料中单因素比较后有统计学差异的因素作为自变量,纳入二元Logistic回归模型。Ⅱ型呼吸衰竭（OR=10.173,95%CI:1.156～85.528）、Apgar评分≤7（1 or5min）（OR=5.518,95%CI:1.383～22.017）、Hb＜90g/L（OR=5.329,95%CI:1.316～21.570）、生后第1 天胆固醇水平（OR=1.881,95%CI:1.022～3.459）为胎龄≤32周早产儿BIPI发生的生后独立危险因素。三、两组早产儿粪便、血清t-4-Hyp水平动态变化比较:（1）BIPI与非BIPI组两组间及不同程度BIPI亚组间粪便t-4-Hyp水平比较:①组间比较:BIPI组早产儿生后3天内、第7、14、28天粪便t-4-Hyp水平均显著高于非BIPI组（P＜0.05）;②组内比较:BIPI组早产儿生后3天内粪便t-4-Hyp水平显著低于第7、14、28天（P＜0.05）,而第7、14、28天粪便t-4-Hyp水平组内比较无显著差异（P＞0.05）;非BIPI组早产儿生后3天内、第7、14、28天粪便t-4-Hyp水平组内比较均无显著差异（P＞0.05）;③不同程度BIPI亚组比较:重度BIPI组早产儿生后第7、14、28天粪便t-4-Hyp水平显著高于轻度BIPI组（P＜0.05）,而生后3天内粪便t-4-Hyp水平无显著差异（P＞0.05）;④粪便t-4-Hyp水平与BIPI严重程度的相关分析:Spearman相关性分析显示,生后第7、14、28天粪便t-4-Hyp水平与BIPI严重程度呈正相关,其中第14天粪便t-4-Hyp水平关联程度最高（r=0.732,P＜0.05）。（2）BIPI与非BIPI组两组间及不同程度BIPI亚组间血清t-4-Hyp水平比较:①组间比较:BIPI组早产儿生后3天内、第7、14、28天血清t-4-Hyp水平均显著高于非BIPI组（P＜0.05）;②组内比较:BIPI组早产儿生后3天内血清t-4-Hyp水平显著低于第7、14、28天（P＜0.05）,而第7、14、28天血清t-4-Hyp水平组内比较无显著差异（P＞0.05）;非BIPI组早产儿3天内、第7、14、28天血清t-4-Hyp水平组内比较均无显著差异（P＞0.05）;③不同程度BIPI亚组比较:轻度BIPI组与重度BIPI组生后3天内、第7、14、28天血清t-4-Hyp水平均无显著差异（P＞0.05）。（3）粪便与血清t-4-Hyp水平相关性分析:分别将生后3天内、第7、14、28天血清、粪便t-4-Hyp水平进行Pearson相关性分析显示:每个时间点二者之间均呈正相关（P＜0.05）,r值分别为0.254、0.490、0.500、0.477。四、t-4-Hyp水平对胎龄≤32周早产儿发生BIPI的预测:绘制ROC曲线,自变量为生后第14天粪便、血清t-4-Hyp水平及二者联合预测,因变量为是否发生BIPI,评估生后第14天粪便、血清t-4-Hyp水平联合对胎龄≤32周早产儿发生BIPI的预测效能,结果显示:联合生后第14天粪便、血清t-4-Hyp水平预测BIPI的AUC为0.942（95%CI:0.888～0.996）,敏感度为97%,特异性为79%。五、胎龄≤32周早产儿发生BIPI的早期预测:以Ⅱ型呼吸衰竭、Apgar评分≤7（1 or 5min）、Hb＜90g/L、生后第1天胆固醇水平、生后第14天粪便、血清t-4-Hyp水平为自变量,联合Logistic回归构建BIPI预测模型,结果显示上述6个指标联合Logistic回归模型绘制ROC曲线,AUC为0.979,敏感度为93.1%,特异性为96.6%,显著高于各指标单独预测。六、随访纠正月龄3～6月龄时早产儿神经系统评估:BIPI组失访3例,非BIPI组失访4例,共计BIPI组26例,非BIPI组25例。结果显示:BIPI组儿心量表-Ⅱ评分显著低于非BIPI组（P＜0.05）,神经20项及儿心量表-Ⅱ评分异常发生率显著高于非BIPI组（P＜0.05）;两组儿心量表-Ⅱ评分临界发生率比较无显著差异（P＞0.05）。结论:（1）Ⅱ型呼吸衰竭、Apgar评分≤7（1 or 5min）、生后第1天胆固醇水平（＜2.64 mmmol/L）、Hb＜90g/L为胎龄≤32周早产儿发生BIPI的生后独立危险因素。（2）BIPI组早产儿生后3天内、第7、14、28天粪便、血清t-4-Hyp水平均较非BIPI组早产儿显著升高;生后第7、14、28天粪便t-4-Hyp水平与BIPI严重程度呈正相关;血清及粪便t-4-Hyp水平在各时间点均呈正相关。（3）Ⅱ型呼吸衰竭、Apgar评分≤7（1 or5min）、Hb＜90g/L、生后第1天胆固醇水平、生后第14天粪便、血清t-4-Hyp水平联合构建回归模型能较好地预测胎龄≤32周早产儿BIPI的发生。（4）在纠正胎龄3～6月龄时BIPI早产儿神经系统发育较非BIPI早产儿差。