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目的:环境内分泌干扰物双酚A(BPA)是工业生产环氧树脂、聚碳酸酯和聚苯乙烯树脂等的前体物质。因加入BPA可以使聚碳酸酯等塑料产品变得无色透明、耐用和防摔,BPA被广泛应用于婴幼儿奶瓶、食品包装材料、塑料餐具和医疗器械等塑料行业。塑料制品的大量使用使得BPA在我们的生活中广泛存在。因BPA的化学结构与明确的人类致癌物己烯雌酚相似,BPA可能的遗传毒性已经引起了国内外学者的广泛关注。然而,关于BPA遗传毒性的研究结果仍存在争议,至今尚未得到统一的结论。目前,有关BPA对雄性大鼠生殖细胞遗传毒性的研究报道相对较少。本研究以BPA为研究对象,通过建立BPA亚急性暴露的动物实验模型探索BPA暴露对成年期SD雄性大鼠生殖细胞的遗传毒性和抗氧化剂褪黑素(MT)对BPA所致毒性效应的拮抗作用,以探讨其可能的机制。方法:SPF级8周龄健康雄性SD大鼠,随机分为:(1)正常对照组;(2)MT处理组,MT10mg/kg体重剂量腹腔注射;(3)BPA处理组,BPA200mg/kg体重剂量经口灌胃染毒;(4)MT预处理+BPA组,大鼠经10mg/kg的MT预处理30min后再灌胃200mg/kg剂量的BPA。每组10只动物,连续处理10天。末次给药24h后,硫代巴比妥酸法测定睾丸组织中MDA含量,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活力;分离睾丸精母细胞,碱性彗星实验检测精母细胞DNA损伤,染色质扩散免疫染色γH2AX检测粗线期精母细胞常染色体上γH2AX阳性焦点数量;流式细胞检测睾丸细胞群中不同DNA含量亚细胞群的细胞数量;TUNEL荧光染色检测生殖细胞凋亡;睾丸组织HE染色观察睾丸组织病理形态学变化。结果:①200mg/kg体重剂量的BPA暴露10天对SD大鼠生长无明显抑制作用,大鼠体重增量、生殖器官睾丸和附睾的重量及精子数量均未出现明显变化(P>0.05)。②200mg/kg体重剂量的BPA处理SD大鼠10天引起了氧化损伤,睾丸组织中MDA含量升高, SOD活力降低(P<0.01)。③BPA暴露引起了睾丸精母细胞DNA损伤。精母细胞彗星参数TL, Tail DNA%, TM和OTM与对照组比较均显著增加(P<0.01);SD大鼠粗线期精母细胞常染色体上γH2AX阳性焦点数量与对照组比较明显增多(P<0.01)。④BPA处理显著降低了睾丸细胞群中4C-DNA含量亚细胞群的细胞数量(P<0.05)。尚未引起生殖细胞凋亡增多和睾丸组织病理形态学的变化。⑤10mg/kg体重剂量的MT对SD大鼠进行预处理后减轻了氧化损伤,和BPA处理组比较睾丸组织内MDA含量降低,SOD活力升高(P<0.05)。⑥MT预处理拮抗了BPA暴露引起的精母细胞DNA损伤。显著降低了DNA损伤的程度(P<0.01)和粗线期精母细胞常染色体上γH2AX阳性焦点的数量(P<0.05);并增加了睾丸细胞群中4C-DNA含量亚细胞群的细胞数量,与单独的BPA处理组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:200mg/kg BPA亚急性暴露10天可引起大鼠精母细胞DNA损伤和生殖细胞比例的改变,但尚未引起细胞周期阻滞、生殖细胞凋亡和睾丸组织形态学变化等严重的DNA损伤不可修复的应答事件。BPA诱发的DNA损伤与睾丸组织中MDA含量升高,SOD活力降低有关。MT10mg/kg体重剂量预处理则可拮抗BPA诱发的损伤。结果提示,氧化应激可能是BPA导致生殖细胞DNA损伤的机制之一,在BPA环境和职业暴露所致遗传毒性的防治药物中,MT具有潜在的应用价值。